Виктор Локтев рвёт и мечет! Итоги третьего дня Кубка Мира.
Три дня Кубка Мира по свободной пирамиде позади.
Три интереснейших дня. Я уже и не припомню когда на турнирах такого ранга было столько сенсаций.
Задала темп Галина Парфёнова, подхватил Шахзод Мамиров, совершивший невероятный камбэк, поддержала перворазрядница Анна Костылева, отправившая домой чемпионку Сибири Юля Трубникову и вице-чемпионку России Дарью Михайлову, удивил своей стабильностью Аннамамед Аннамамедов из Туркменистана.
Кстати, у Аннамамеда в профиле на турнаменте стоит ЗМС… Хм… В Турмении выдают ЗМСов по специальной разнарядки независимо от выступлений?
Турнир получается настолько интересным, что можно пересматривать один матч за другим.
Я рекомендую контровую партию Костылева — Михайлова.
Мачт Аннамамедов — Белозёров.
Виктор Локтев — Леонид Швыряев.
В общем, удивляться было чему. Конечно, при игре в комбинированную пирамиду, а то и в московскую по старым правилам, таких сенсацией бы кот наплакал.
Свободная пирамида даёт простор для удивительных матчей.
Всё это конечно интересно, но больше всего радует выступление Виктора Локтева. Ох, похоже, не зря я в самом первом отчёте написал, что Виктор вполне может составить хорошую конкуренцию топовым игрокам.
Хотя свободная пирамида явно не является его коньком.
Вчера Виктор Локтев сперва обыграл неизвестного Василия Чурара, а на закуску в тяжелейшем матче одолел Леонида Швыряева.
Леонид кругом ранее в напряженном поединке выбил из турнира Иосифа Абрамова. Может быть сказалась усталость? Хотя, как теперь разница, когда сибирский спортсмен прошёл в 1/4 финала.
Правда, соперник не самый простой — Сергей Крыжановский. Пока Сергей идёт как каток, закатывая своих соперников под сукно, практически без единого шанса.
Сочетании хорошей реализации стандартов и кладка космических шаров делают своё дело.
Но, сибирский характер — это вам не хухры мухры и я уверен, что Виктор не просто сможет оказать сопротивление, но вполне способен отправить звезду молдавского бильярда на зрительские трибуны.
Продолжение сегодня в 15:00 по новосибирскому времени.
Биография, титулы, достижения | Тренер по бильярду Василий Лазарев
Василий Васильевич Лазарев
МСМК
Многократный призер этапов Кубка Мира Международной Профессиональной Лиги Русского Бильярда (МПЛРБ), Кубка Балтии. Профессиональный тренер по русскому бильярду.Автор книги «Бильярд: игра разума и силы воображения».
Учениками Василия Лазарева в разное время были такие ведущие спортсмены, как Аслан Бузоев, Даниил Богушевский, Сергей Тузов, Армен Габриелян, Анастасия Луппова, Ольга Прохорова и многие другие. Василий Лазарев является автором собственной запатентованной методики обучения русскому бильярду. Занятия Лазарев проводит в своей школе в БК «Советский».
Биография Василия Лазарева:
Василий Васильевич Лазарев родился в 1970 г. в Самарканде. В 15 лет в бильярдной парка «Молодая гвардия» Лазарев знакомится с бильярдом. Первым учителем для него стал работавший там маркер Талат-Ака. Уже в 1989 году Василий Лазарев считается в своем родном городе сильнейшим игроком.
В 1997 году Лазарев переезжает в Ташкент, где знакомится с чемпионом мира по Московской пирамиде Дмитрием Ханом и легендарным игроком Юрием Сосниным, который вскоре становится его наставником и первым профессиональным тренером. Дмитрий и Юрий советуют Василию попробовать силы на официальных соревнованиях. В 1997 году Лазарев выступает на своем первом чемпионате по пирамиде в Екатеринбурге и входит в шестнадцать сильнейших игроков.
В 1998 году Лазарев принимает участие в Азиатских Олимпийских играх по снукеру. Вместе с Юрием Сосниным они серьезно изучают снукер и тренируются по снукерной школе. Впоследствии именно снукер, его каноны и техника, становится базой для создания Василием Лазаревым новой методики обучения бильярду.
В 1999 году Лазарев работал тренером в Детско-юношеской бильярдной школе в Кемерово. В конце этого же года Василий переезжает в Москву, где тренируется вместе с Асланом Бузоевым в легендарном бильярдном клубе «Кино». Буквально каждый день на протяжении нескольких лет Василий находится у бильярдного стола, полностью посвятив себя тренировкам и изучению бильярда.
В 2001 году Сергеем Локтевым была создана Международная Профессиональная Лига Русского Бильярда, в которую вошли 32 сильнейших профессиональных игрока, среди которых был и Василий Лазарев. Турниры Лиги на тот момент считались самыми престижными соревнованиями по русскому бильярду. Лазарев участвовал в трех чемпионатах Лиги и трижды становился полуфиналистом.
В 2001 году Василий Лазарев заканчивает свою книгу «Бильярд: игра разума и силы воображения», которую по праву относят к лучшим учебным пособиям по игре на русском бильярде. Спустя несколько лет при поддержке клуба «Принц» был также выпущен одноименный учебный DVD-диск.
В 2006 году Василий Лазарев вместе со своей ученицей Ольгой Прохоровой (чемпионкой России) организовал Детско-юношескую бильярдную школу в клубе «Принц».
В 2010 году Василий Лазарев открывает школу русского бильярда в клубе «Советский».
С 4 июля 2013 г. Василий Васильевич Лазарев является Главным тренером сборных команд Федерации бильярдного спорта России.
С 01 сентября 2017 года школа Василия Лазарева находится в бильярдном клубе «Джентльмены Удачи» по адресу ул. Тимирязевская 2/3, где он и проводит индивидуальные тренировки по настоящее время.
Кемерово | Бильярд. Рождение новой звезды
В Кемерове определился чемпион мира по комбинированной пирамиде. Им стал 22-летний украинец Ярослав Тарновецкий. В решающем матче он обыграл кемеровчанина Виктора Локтева – 6:3.
Впереди планеты всей
Шестьдесят два бильярдиста из двадцати восьми стран – таковы количественные характеристики чемпионата. Впечатляли и качественные показатели мирового форума: несколько заслуженных мастеров спорта и чемпионов мира разных лет, признанные мастера снукера и пула, приехавшие из дальнего зарубежья. Причем некоторым из них, как, например, американцу Дитеру Джонсу, и на турнире по «непрофильному» виду спорта удалось показать себя во всей красе: представитель США едва не выиграл у сильного белорусского спортсмена Олега Жигимонта, ведя по ходу встречи со счетом 5:3.
– Мы уже собирались звонить Александру Лукашенко в Минск, — смеялся другой белорус Олег Речиц, – чтобы Жигимонту запретили право вернуться на родину как предателю. Но все обошлось…
И все же, если говорить серьезно, разница между мастерами «пирамиды», которую в основном культивируют в республиках бывшего СССР, и бильярдистами из других стран огромна. Тот же самый Ярослав Тарновецкий после тяжелейшего матча с молдаванином Сергеем Крыжановским всего за каких-то 50 минут разделал под орех Каспера Филипиака из Польши. Примечательно, что этому снукеристу, победителю этапов Кубка мира, не удалось закатить больше двух шаров за партию!
– Если бы у меня были связаны руки и я бы играл с закрытыми глазами, то все равно бы победил, — признался после того матча Ярослав.
В этом смысле вполне понятно, почему приз лучшему иностранному игроку от якутской федерации бильярда достался вовсе не Касперу за его выход в 1/8 финала и не чеху с российским паспортом Гагику Арутюняну, также пробившемуся в число шестнадцати сильнейших, а исландскому чемпиону мира Кристиану Хельгасону, вылетевшему еще на первом этапе. Ведь уроженцу Рейкьявика в соперники достался лидер белорусской сборной Евгений Курта, и Кристиан, даже проиграв в итоге со счетом 2:6, выглядел очень достойно. Тем более что мощь его «обидчика» была подтверждена уже в ближайших матчах, когда под горячую руку белоруса попались кемеровчанин Сергей Тузов и заслуженный мастер спорта Юрий Пащинский из Москвы.
Тише едешь – первым будешь?
Этот «домашний» чемпионат мира для кемеровчанина Виктора Локтева стал логичным продолжением завершившегося накануне чемпионата России, где он, к удивлению многих, стал бронзовым призером. И здесь он поначалу играл так же неспешно — с затяжными отыгрышами и хитрыми комбинациями, затрачивая по четыре-пять часов на матч. И реванш у Чепикова он взял замечательно: бывший чемпион мира не смог ничего методичному кузбассовцу противопоставить. Однако лучший матч Локтева на мировом форуме все-таки был сыгран против Никиты Ливады. Ибо в полуфинале болельщики увидели другого кемеровчанина: взрывного, атакующего и рискового. В последних партиях он словно давал сопернику фору, а затем сравнивал счет и четко ставил точку, забивая серию шаров с одного кия.
– Честно говоря, Локтев заставил меня понервничать, когда отыграл три партии кряду, но ощущения возможного перелома не было. Я верил в победу, — признался после финала Ярослав.
А Виктор, по его собственному признанию, «будет играть дальше ради удовольствия». Вполне возможно, что уже на сентябрьском чемпионате мира по свободной пирамиде в Якутске Локтеву повезет больше. Но в любом случае благодаря турнирам в Кемерове на небосклоне мирового бильярда зажглась еще одна яркая звезда.
Сергей СПИЦЫН.
НА СНИМКАХ: Алихан Каранеев из Казахстана очень старался выиграть, но уже после первого матча ему пришлось «зачехлить кий»; в финальном поединке Виктору Локтеву помогал советами его отец Сергей – один из главных «организаторов и вдохновителей» развития бильярда в Кузбассе; чемпион мира по комбинированной пирамиде Ярослав Тарновецкий с новым трофеем.
Табло
Чемпионат мира по бильярдному спорту («комбинированная пирамида»)
1/2 финала.
Ярослав Тарновецкий (Украина) – Александр Паламарь (Украина) – 6:4.
Никита Ливада (Россия) – Виктор Локтев (Россия) – 4:6.
Игроки, уступившие в полуфиналах, удостоены бронзовых медалей.
Финал.
Виктор Локтев – Ярослав Тарновецкий – 3:6 (0:8, 1:8, 3:8, 1:8, 7:8, 8:3, 8:0, 8:5, 2:8).
Loading… Данный материал опубликован на сайте BezFormata 11 января 2019 года,
ниже указана дата, когда материал был опубликован на сайте первоисточника!
Ярослав Тарновецкий — чемпион мира по комбинированной пирамиде
На чемпионат мира в Кемерово заявилось 62 игрока из более чем 20 стран мира, два спортсмена попали на кресты — Андрей Глушанин и Юрий Пащинский. Посева на чемпионате не было, таким образом, уже в первом круге нас ждут интереснейшие матчи: Павел Меховов — Каныбек Сагындбаев, Олег Речиц — Алихан Каранеев. Матчи будут проходить до 6 побед и, видимо, без ограничения по времени.
Белорусским спортсменам достались следующие соперники: Евгений Курта со снукеристом из Исландии Кристианом Хельгассоном, Олег Жигимонт с пулистом Дитером Джонсом из США, Яшуш Маркоцинский с сильным армянином Арменом Габриеляном.
Интересно понаблюдать за выступлением на чемпионате Виктора Локтева и Александра Сидорова, считающимися сильными коммерческими игроками.
Первый день соревнований:
Результаты первого дня оказались вполне предсказуемыми, 11 матчей завершились со счетом 6-0, но что здесь удивительного, если на чемпионате мира играют сильнейшие игроки русского бильярда со спортсменами имеющими практику игры в пирамиду как и у любого залетного посетителя бильярдной.
Для белорусских спортсменов день оказался довольно успешным — Олег Речиц обыграл сильного казаха Алихана Каранеева 6-5 и в следующем матче сыграет с победителем первого миллионника сезона Александром Сидоровым, Женя Курта размялся на исландце Кристиане Хельгассоне, в следующем круге Евгения ждет более серьезное испытание в лице Сергея Тузова, Януш Маркоцинский уступил представителю Армении Армену Габриеляну, но с удивительным для своей тягучей игры счетом 0-6, дебютант чемпионата мира Олег Жигимонт из Жодино с трудом преодолел первый раунд в лице пулиста из США Дитера Джонса 6-5, забив «фуксом» 8 шар в решающей партии. В следующем круге Олега будет экзаменовать Александр Банный, ставший на этой неделе чемпионом России по комбинированной пирамиде.
Уже завтра на турнире пройдут интереснейшие матчи: Фрейзе-Паламарь, Осьминин-Сагындбаев, Сагындыков-Чимбаев, Чепиков-Белозеров, Тарновецкий-Крыжановский, Глушанин-Горыславец.
Второй день соревнований:
Успешно стартовали игроки, пропустившие первый игровой день. Юрий Пащинский уверенно обыграл украинца Александра Бедёвку 6-2, а чемпион Беларуси по комбинированной пирамиде Андрей Глушанин без проблем обграл вице-чемпиона Европы Сергея Горыславца 6-3. В следующем матче Андрея ждет серьезное испытание в лице победителя матча Осьминин-Сагындыков.
Вышел в 16 сильнейших Олег Речиц. В тяжелом матче в последнем шаре в контровой партии был повержен победительтурнира Киров-миллион 2013 Александр Сидоров, считавшийся одним из главных фаворитов турнира. По ходу встречи Олег уступал 3-5, но смог выиграть три партии подряд. За выход в четвертьфинал Речиц сыграет с действующим чемпионом мира по комбинированной пирамиде Александром Чепиковым, победившим Дмитрия Белозерова 6-3. Напомню, что до этого матча Дмитрий выиграл три турнира подряд!!!
Баранку получил Олег Жигимонт от чемпиона России Александра Банного 0-6.
В матче казахском противостоянии сильнее оказался трехкратный чемпион мира Каныбек Сагындыков, обыгравший со счетом 6-4 Ернара Чимбаева. За выход в четвертьфинал Каныбек поспорит с Александром Паламарем, победившим в отличной борьбе Андрея Фрейзе из Кемерово со счетом 6-4, пять партий в матче завершились со счетом 8-0.
Соперником Андрея Глушанина стал чемпион мира, чемпион европы, абсолютный чемпион России Владислав Осьминин, на удивление легко обыгравший Каныбека Сагындбаева 6-1.
В матче-триллере между Евгением Куртой и Сергеем Тузовым победу одержал наш спортсмен, как полагается в контровой партии, в последнем шаре. За выход в восьмерку сильнейших Курта поспорит с Юрием Пащинским. Надеемся, после такого затяжного матча силы у Жени еще остались.
Поляк Каспер Филипяк, обыграв австрийца Вольфа Эндрикоу и шотландца Крэга Макджилливрея, вышел в 16 сильнейших игров планеты. Но уже в четвертьфинале избежать встречи с игроком в русский бильярд ему не удалось. Его соперником стал чемпион мира по динамической пирамиде Ярослав Тарновецкий, обыгравший в сложнейшем матче Сергея Крыжановского со счетом 6-5. В контровой партии Ярославу очень помогли два «дурака». Что должно помочь в четвертьфинале Касперу? Я не знаю. Будет чудом, если он возьмет хоть партию у Тарновецкого.
Начинаются встречи 1/8 финала.
Первым четвертьфиналистом стал Ярослав Тарновецкий, обыгравший Каспера Филипяка из Польши со счетом 6-0. Следует отметить, что спортсмены начали свой матч последними из пар 1/8 финала, а закончили первыми. За выход в полуфинал Ярослав поспорит с чемпионм России Александром Банным, остановившем казахского спортсмена Куаныша Абпасова со счетом 6-4.
К сожалению, не сдюжил перед чемпионом мира по комбинированной пирамиде Олег Речиц, уступив в упорной борьбе Александру Чепикову 4-6. В четвертьфинале он сыграет с Виктором Локтевым, без проблем идущим по турнирной сетке. Стоит отметить, что спортсмены встречались в начале этой недели, в полуфинале чемпионата России. Сильнее был Александр Чепиков, победивший со счетом 7-5.
Пятым полуфиналистом стал Никита Ливада, в матче характеров обыграв Армена Габриеляна в контровой партии. Весь матч вел молодой армянский бильярдист 2-0, 3-2,4-3,5-4 по партиям и ведя 6-2 в десятой партии, упустил инициативу и проиграл партию. В решающей партии Ливада смотрелся увереннее и заслуженно вышел в восьмерку сильнейших.
К сожалению, покидает турнир очередной наш спортсмен — Андрей Глушанин уступил дорогу в четвертьфинал Владиславу Осьминину, уступив со счетом 3-6. Таким образом, на турнире остался один белорусский игрок — Евгений Курта, который на данный момент ведет в матче с Юрием Пащинским 4-3.
В игре двух ЗМС сильнее оказался украинец Александр Паламарь.Он просто задавил Каныбека Сагындыкова своим напором: много рисковал, хорошо отыгрывался, в общем сыграл на пять с плюсом. Именно Саша стал соперником Влада Осьминина по четвертьфиналу.
Последним четвертьфиналистом, на радость белорусским болельщикам, стал Евгений Курта, победивший не в простой борьбе экс-чемпиона мира Юрия Пащинского со счетом 6-3.
Таким образом, на чемпионате мира осталось восемь сильнейших игроков, из них 2 украинца, 5 россиян и наш Евгений Курта.
Третий день соревнований:
Четвертьфинальные пары:
Ливада — Курта 6-1(2:8,8:5,8:2,8:4,8:5,8:0,8:6)
Чепиков — Локтев 2-6 (7:8,4:8,8:2,3:8,4:8,0:8,8:6,0:8)
Тарновецкий — Банный 6-5 (0:8,8:2,8:1,4:8,8:0,0:8,7:8,8:5,7:8,8:0,8:7)
Паламарь — Осьминин 6-2 (5:8,8:1,2:8,8:1,8:0,8:4,8:0,8:5)
Первым полуфиналистом турнира стал Александр Паламарь. Он не слишком удачно начал встречу с чемпионом мира и европы Владиславом Осьминином, после трех партий Саша уступал 1-2, но, видимо, вспомнив, что ни разу не побеждал на чемпионате мира, в потрясающем стиле выиграл 5 партий подряд. Александр находится в потрясающей форме и, такое чувство, что остановить его может только он сам.
Покидает турнир Евгений Курта. Не самый выразительный матч провел наш спортсмен. Уверенно выиграв первую партию, Женя уступил шесть партий в ряд и получил скрытую баранку. Курта попытался играть под диктовку Никиты Ливады, но не смог, хоть и сам россиянин провел не лучший свой матч. В полуфинале Ливаде придется очень непросто — Локтев и Чепиков играют в очень закрытый бильярд. На данным момент счет в их противостоянии 3-1 в пользу Виктора Локтева.
В матче чемпиона мира Ярослава Тарновецкого и чемпиона России Александра Банного шла бескомпромиссная борьба. Оба игрока, находящиеся в отменной форме, поочередно лидировали в матче, первым до отметки в пять партий дошел чемпион России, однако, уже в следующей партии абсолютный чемпион Украины сравнивает счет в матче прекрасной серией 8-0 и переводит матч в финальную фазу. Контровая партия прошла по лучшим канонам бильярдной борьбы — все решалось в последнем шаре, который достался представителю Украины Ярославу Тарновецкому. Таким образом, Ярослав стал соперником свего соотечественника Александра Паламаря по полуфиналу.
Соперником Никиты Ливады стал Виктор Локтев, который в отличном стиле укатал действующего чемпиона мира по комбинированной пирамиде Александра Чепикова 6-2. Таким образом, завтра мы узнаем имя нового чемпиона мира.
Полуфинальные пары:
Паламарь-Тарновецкий 4-6 (8:6,2:8,2:8,8:7,2:8,8:2,8:4,0:8,3:8,3:8)
Локтев-Ливада 6-4 (8:1,0:8,8:3,7:8,8:5,0:8,8:0,4:8,8:0,8:1)
Исходя из полуфинальных пар, можем сделать вывод, что финал получится русско-украинским.
Первым финалистом стал чемпион мира по динамической пирамиде Ярослав Тарновецкий. Матч был равным, но при счете 4-3 в пользу Александра он почему-то начал заметно нервничать, Ярослав же был полностью невозмутим и уверенно выиграл три партии подряд, победив со счетом 6-4. Это поражение расстроило многих поклонников игры Александра Паламаря, ведь при игре, показанной украинцем в предыдущих матчах, вполне логично ожидали столь долгожданного титула чемпиона мира.
Соперником Ярослава по финалу стал Виктор Локтев из Кемерово, обыгравший своего молодого соотечественника со счетом 6-4. Уровень матча был очень высокий, спортсмены практически не допускали ошибок, после счета 4-4, Виктор позволил забить Ливаде лишь один шар.
Финал:
Виктор Локтев — Ярослав Тарновецкий 3-5 (0:8,1:8,3:8,1:8,7:8,8:3,8:0,8:5,
Уверенно начал финальный матч чемпион мира Ярослав Тарновецкий, и пока ничего не получается у Виктора Локтева. 3-0 в пользу украинского спортсмена, матч длится до 6 побед, поэтому Локтеву нужно обязательно браться за дело уже в следующей партии. Преимущество наращивает Ярослав, очередная партия идет в его копилку 4-0. После 15 минутного перерыва вновь возобновился матч, Виктор Локтев сделал серию из 7 шаров, не забив не самый сложный восьмой шар. Каждый забитый шар сопровождался бурными аплодисментами, в зале заметно больше людей береживают за Локтева. Идет серия отыгрышей, кровь из носа нужна эта партия россиянину. Вырывает очередную партию Ярослав, уступая 0-7 по шарам!!!! Видимо, это все, в шаге от титула находится Тарновецкий. В шестой партии 7-3 ведет Локтев, а на ударе Тарновецкий. То ли пропих, то ли что -то другое, но победа в партии отдается Виктору. Размачивает счет в финальном матче представитель Кемерово 1-5. В отличном стиле провел седьмую партию Локтев 8-0 и счет в матче 2-5. 5-0 по шарам вел Тарновецкий, но восемь шаров с кия от Локтева и счет в матче сокращен до двух партий 3-5. Все! Кричат из зала: «Ярик — молодец!!!». Действительно молодец — 8-2 в партии и 6-3 в матче и Тарновецкий впервые в карьере выигрывает титул чемпиона мира в комбинированной пирамиде. Два подряд чемпионата мира выигрывает Ярослав. В прошлом году он выиграл чемпионат по динамической пирамиде! Отличный финал, достойные соперники.
Он-лайн трансляция матчей:
Результаты, сетка, участники:
strong
Чемпионат мира по «свободной пирамиде». Итоги первого дня
Ежегодный чемпионат мира по свободной пирамиде в текущем году проводится в Якутске. И уже с первого дня соревнований есть неожиданности, некоторые, как казалось до начала чемпионата, лидеры уже успели положить свои кии в чехлы.
Первенство мира по свободной пирамиде и в то же время согласно олимпийской системе, очень не привычно выглядит. Также не привычно звучит тот факт, что уже в первый день соревнований Я. Тарновецкий, и А.Палмарь вынуждены были поехать домой. Чтобы как-то успокоить поклонников украинской сборной, отметим, что это, несомненно, серьезная потеря, но вместе с эти они проиграли очень сильным соперникам.
Чего только стоит опыт Никиты Ливаде, в прошлом Чемпиона мира, который славится на весь мир своей кладкой, и сильными нервами. Тарновецкий не смог с этим справится, эго скованность особо наблюдалась в последних партиях. Возможно, это связано с тем, что Ярослав не успел адаптироваться к климатическим условиям Якутии.
Касательно Яна Григорбева, с которым сражался Александр Палмарь, то поначалу именно он считался фаворитом этого матча. Он тоже имеет много опыта, и в своей карьере постиг много побед. На его счету два бронзовых места на этапах Кубка Европы в 2007 году. В прошлом году эти два игрока уже встречались, правда, на соревновании, не столь высокого уровня в финале Кубка Островского. Тогда украинец одержал победу. В этом году все немножко изменилось, белорусу удалось все-таки взять долгожданный реванш.
Кроме Ярослава, и Александра в первый день соревнований выбили еще несколько представителей Украины на этом турнире. Это В. Перкун, Е. Талов, Д. Белозёров, и А.Моисеенко. И опять та же невезуха. Соперником Дмирия стал Васиф Мамедов, который в этом году занял третье место на престижно турнире в Вологде. Артему попался представитель Казахстана, и в то же время действующий чемпион Алибек Омаров. Два года назад Алибек вошел в призеры Чемпионата мира. Владимира обыграл Виктор Локтев, в прошлом году чемпиона мира. Среди всех встреч украинских представителей, только Евгений был фаворитом в состязании с Игорем Фомкиным. Но видимо что опыт, обретенный Игорем на чемпионате России среди юношей, и на этапе Кубка России, где он ставал призером, помог ему выиграть встречу с украинцем.
Среди представительниц прекрасного пола, по результат первого дня соревнований выбыли А. Котляр, Т. Мелихова, З. Притулюк. Татьяна на данный момент является действующей чемпионкой Украины. Турнир также покинула Мария Турчина, чемпионка Европы 2008 года.
21.07.14
А чо НВК Саха не будут транслировать ЧМ по бильярду? — Karamba
Покопался покопался на ихнем сайте http://nvksakha.ru/news/
так и не нашел инфы..
и сайт какой то, в общем непонятный
Зато по запросу на ЧМ бильярд Якутия йандекс выдал фотку Дипломата
хотя где-то в новостях недавно говорили будто какие то спецы по съемке бильярда приехали
и на сайте Бильярд спорт ничего нет про трансляцию =((
Долгожданный чемпионат мира по свободной пирамиде стартовал!
В Якутск съехалось 115 мужчин из 17 стран и 34 женщины из пяти. Из тех, кто отобрался на чемпионат мира, не приехали только победитель кубка мэра Москвы Марис Вартик, а также Оксана Привалова и Елена Бунос.
Матчи пройдут по олимпийской системе со старта. У мужчин до семи побед, у женщин, по-видимому, до пяти. Очевидно, что на сегодня это наиболее оптимальная система проведения турнира.
Безусловно, главный «хит» мужского турнира в 1/64 финала – встреча Ярослава Тарновецкого и Никиты Ливады. А уже в 1/16 либо Ярослав, либо Никита пересекутся по сетке с кем-то из тройки Белозеров-Мамедов-Осьминин.
Особый интерес в первом круге вызывают матчи Виктор Локтев – Владимир Перкун, Артур Пивченко – Евгений Назаренко (победители этих встреч сыграют между собой), Олег Речиц — Юрий Пащинский, Алибек Омаров – Артем Моисеенко.
Один из самых интересных и ожидаемых матчей всего турнира будет сыгран, очевидно, уже в 1/32 финала. Победитель матча Александр Паламарь – Ян Григорьев встретится с Евгением Сталевым.
Продолжаем изучать сетку дальше.
На одну медаль (верхние 32 игрока) серьезными претендентами выглядят Юрий Пащинский и Сергей Тузов (особенно, с учетом проведенных сборов).
На следюущую медаль круг претендентов гораздо шире. Тут и Каныбек Сагындыков, и Ярослав Тарновецкий, и Владислав Осьминин, и Виджай Дрангой, и Евгений Салтовский, и Павел Радионов, и Евгений Талов, и Павел Меховов. Отмечу, что множество факторов — в первую очередь, очень серьезный призовой фонд и длинная дистанция матчей говорят в пользу того, что сенсаций ожидать не следует. Вполне очевидно, что главный титул русского бильярда, как это и было всегда, выиграет кто-то из 15-20 всем известных ведущих игроков.
Уже упоминавшиеся Сталев и Паламарь, а также хозяин турнира Александр Чепиков — явные претенденты на еще одну награду. В этой же «четвертушке» сетки Армен Габриелян. Евгений Курта и Сергей Крыжановский.
Наиболее явные претенденты на четвертую медаль — Каныбек Сагынбаев, Андрей Фрейзе, Артур Пивченко, Виктор Локтев.
У женщин оказались разведены по разным половинам сетки Диана Миронова и Ольга Милованова, и Якутск «замер» в ожидании очередного финала «Ми-Ми». Наталья Корнева, похоже, будет фаворитом в борьбе за одну из двух «бронз», а на вторую претенденток больше — Наталья Трофименко. Анастасия Ковальчук, Заряна Притулюк…
Представительство по странам:
Мужчины. Россия — 34, Украина — 16, Беларусь — 13, Кыргызстан — 9, Казахстан — 8, Молдова — 7, Азербайджан — 6, Узбекистан — 5, Армения, Финляндия — по 3, Латвия, Литва, Монголия — по 2, Чехия, Германия, Израиль, США, Хорватия (выступавший год назад за Литву Максим Лукашик) — по 1. Радует тот факт, что организаторы отказались от порочной кемеровской практики, и не стали натягивать количество стран, собирая по миру снукеристов и пулистов.
Женщины. Россия — 14, Украина — 10, Беларусь — 7, Кыргызстан — 2, Латвия -1 . С возвращением Светланы Максимовой и Ольги Прохоровой под российский флаг, очевидно завершил свою историю армянский женский бильярд.
Начало матчей завтра в 11:00 по местному времени (5:00 мск, 4:00 по Киеву).
Настроение: Холодно шопздц
1 | Сергей МАЛЕВАНЫЙ | Россия | Мурманск |
2 | Сергей ЗОРЕНКО | Россия | Мурманск |
3 | Джамолитдин КУЧКАРОВ | Узбекистан | Ташкент |
4 | Зухриддин ХАШИМОВ | Узбекистан | Ташкент |
5 | Зухриддин ШАРИПОВ | Узбекистан | Ташкент |
6 | Размик ВАРДАНЯН | Россия | Волгоград |
7 | Антон ЛАНДА | Россия | Петрозаводск |
8 | Александр ЕРМАКОВ | Россия | Петрозаводск |
9 | Станислав ЯРКОВ | Россия | Петрозаводск |
10 | Азат ТУМЕНОВ | Казахстан | Актобе |
11 | Артем ЕРОХИН | Россия | Ростов-на-Дону |
12 | Роман КИРЕЙЧУК | Россия | Ярославль |
13 | Александр ОДЕГОВ | Россия | Калининград |
14 | Евгений ПЕТРОВ | Россия | Калининград |
15 | Владислав ОСЬМИНИН | Россия | Ростов-на-Дону |
16 | Игорь ПОЕЗЖАЛОВ | Россия | Уфа |
17 | Эдуард ГАЛИЯНЦ | Россия | Новый Уренгой |
18 | Салхан МУСТАЕВ | Россия | Казань |
19 | Сергей ГОРЫСЛАВЕЦ | Россия | Казань |
20 | Эйнар ЗАМАЛЕЕВ | Россия | Казань |
21 | Артем ХЛЕБНИКОВ | Россия | Казань |
22 | Шамиль ГАБДРАХМАНОВ | Россия | Казань |
23 | Всеволод ТИТОВ | Россия | Петрозаводск |
24 | Гешем ГУСЕЙНЗАДЕ | Азербайджан | Баку |
25 | Наиль МАГЕРРАМОВ | Россия | Москва |
26 | Александр ИНДЖИЕВ | Россия | Элиста |
27 | Станислав ПЕШЕВ | Россия | Саранск |
28 | Алексей КОСТЮК | Россия | Москва |
29 | Сергей МАНСУРОВ | Россия | Йошкар-Ола |
30 | Владимир ИМКИНОВ | Россия | Элиста |
31 | Виктор КРЮКОВ | Россия | Москва |
32 | Виталий ГРЕБЕНЬКОВ | Россия | Новосибирск |
33 | Вадим КОРОЛЕВ | Россия | Челябинск |
34 | Илья СУРМИН | Россия | Москва |
35 | Антон ЖОГИН | Россия | Санкт-Петербург |
36 | Игорь БУДЫЛДИН | Россия | Тюмень |
37 | Вадим БЕЛОГЛАЗОВ | Россия | Калининград |
38 | Тихон ЧЕРЕВАТОВ | Россия | Санкт-Петербург |
39 | Александр ШЕВЕЛЕВ | Россия | Красноярск |
40 | Евгений НИКИТЕНКО | Россия | Красноярск |
41 | Евгений ЯЦЕНКО | Молдова | Тирасполь |
42 | Андрей БУРДАНОВ | Россия | Мытищи |
43 | Степан ДЖЕНАНЯН | Россия | Сургут |
44 | Александр ЕСАКОВ | Россия | Санкт-Петербург |
45 | Кирилл ЦЫНГАЛЕВ | Россия | Санкт-Петербург |
46 | Евгений ПРУСАК | Россия | Санкт-Петербург |
47 | Эдуард МЕЗЕР | Россия | Санкт-Петербург |
48 | Юрий ТУПОЛОВ | Россия | Мурманск |
49 | Сергей БОГДАНОВ | Беларусь | Витебск |
50 | Виктор ЛОКТЕВ | Россия | Кемерово |
51 | Андрей КОВАЛЕВ | Украина | Луганск |
52 | Вячеслав СМОЛЬЯНИНОВ | Россия | Волгоград |
53 | Вадим ВИЗЕЛЬТЕР | Россия | Санкт-Петербург |
54 | Куаныш АБПАСОВ | Казахстан | Астана |
55 | Вадим БЕРДЫШЕВ | Россия | Москва |
56 | Зайлан АДАМОВ | Кыргызстан | Бишкек |
57 | Константин КУЛИК | Украина | Днепропетровск |
58 | Артур ПИВЧЕНКО | Украина | Запорожье |
59 | Александр БЕДЕВКА | Украина | Мариуполь |
60 | Ильяс АДАМОВ | Кыргызстан | Бишкек |
61 | Антон НЕТЕСОВ | Кыргызстан | Бишкек |
62 | Араик ТЕР-ИСАЯН | Армения | Ереван |
63 | Вагэ ГРИГОРЯН | Россия | Пятигорск |
64 | Андрей ДИМОВ | Россия | Липецк |
65 | Рашид РАСКУЛОВ | Казахстан | Павлодар |
66 | Сергей КУРДЮКОВ | Россия | Киров |
67 | Алексей ВОЛКОВ | Россия | Зеленоград |
68 | Каныбек САГЫНБАЕВ | Кыргызстан | Бишкек |
69 | Максим ЛУКАШЕВ | Россия | Москва |
70 | Дмитрий МАЛЬКОВ | Россия | Ковров |
71 | Максим ВИНОГРАДОВ | Россия | Ковров |
72 | Иван БЕЛЯЕВ | Россия | Владимир |
73 | Алексей САФИН | Россия | Владимир |
74 | Борис ГРИГОРЬЕВ | Россия | Пятигорск |
75 | Иван ЛОБАНОВ | Россия | Москва |
76 | Кирилл ФИЛИППОВ | Россия | Ростов-на-Дону |
77 | Евгений РОГАЧЕВ | Россия | Уфа |
78 | Павел БОРИСЕНКО | Россия | Уфа |
79 | Никита ИСАЙЧЕВ | Россия | Уфа |
80 | Артем ТУМАСЯН | Россия | Сочи |
81 | Артур АЛЯБЬЕВ | Россия | Зеленоград |
82 | Святослав СЕМЕНОВ | Беларусь | Гомель |
83 | Ян ГРИГОРЬЕВ | Беларусь | Гомель |
84 | Денис СМИРНОВ | Россия | Оренбург |
85 | Валерий ЛЫНДИН | Россия | Оренбург |
86 | Владимир ВАЙНЦВАЙГ | Россия | Москва |
87 | Анатолий ДМИТРИЕВ | Россия | Оренбург |
88 | Эдуард АКОПЯН | Армения | Ереван |
89 | Святослав ГУСЕЛЬНИКОВ | Россия | Пермь |
90 | Григорий ГРИГОРЬЯН | Россия | Сочи |
91 | Дмитрий РАЙКОВ | Россия | Москва |
92 | Евгений КУРТА | Беларусь | Борисов |
93 | Антон СИЛАКОВ | Россия | Курск |
94 | Алексей СОЛОВЬЕВ | Россия | Санкт-Петербург |
95 | Максим ШОРНИКОВ | Беларусь | Витебск |
96 | Алексей ДЕНИСОВ | Россия | Санкт-Петербург |
97 | Андрей ПРОКОФЬЕВ | Россия | Москва |
98 | Олег РЕЧИЦ | Беларусь | Пружаны |
99 | Андрей ГЛУШАНИН | Беларусь | Борисов |
100 | Михаил ДЕЛЬДИНОВ | Россия | Элиста |
101 | Ярослав ГУБИН | Россия | Ульяновск |
102 | Анатолий КОЧКОВ | Россия | Ульяновск |
103 | Владимир ПЕТУШКОВ | Россия | Краснодар |
104 | Кирилл АНИЩЕНКО | Россия | Краснодар |
105 | Дмитрий ЮРТАЕВ | Россия | Краснодар |
106 | Юрий ФЕДОРОВ | Россия | Краснодар |
107 | Сергей АРУТЮНЯН | Россия | Краснодар |
108 | Евгений НАЗАРЕНКО | Россия | Краснодар |
109 | Александр ЧЕПИКОВ | Россия | Якутск |
110 | Юрий ПАЩИНСКИЙ | Россия | Москва |
111 | Ильдар МИНГАЗИТДИНОВ | Казахстан | Шымкент |
112 | Эмиль МУДАРИСОВ | Казахстан | Алматы |
113 | Евгений СЛЕПЦОВ | Россия | Москва |
114 | Евгений ПАЛАМАРЬ | Украина | Харьков |
115 | Вячеслав ПОЛУПАНОВ | Россия | Шебекино |
116 | Владимир ИЛЬИН | Россия | Н.Новгород |
117 | Илья АНДРИЯШИН | Россия | Наро-Фоминск |
118 | Артем СЕМЕНЦОВ | Россия | Омск |
119 | Иван ФЕОКТИСТОВ | Россия | Курск |
120 | Денис ПОЛУБКОВ | Россия | Тамбов |
121 | Алексей БЫЧКОВ | Россия | Липецк |
122 | Павел ЦУРУКИН | Россия | Курск |
123 | Алексей КОРЕНЬ | Россия | Москва |
124 | Армен ГАБРИЭЛЯН | Армения | Липецк |
125 | Петр СЕСЕКИН | Россия | Москва |
126 | Александр БАННЫЙ | Россия | Москва |
127 | Михаил АГАРОНОВ | Россия | Москва |
128 | Дмитрий ПЕТРОПАВЛОВСКИЙ | Россия | Москва |
129 | Максим МАСЛОВ | Россия | Москва |
130 | Андрей КАНАКОВ | Россия | Москва |
131 | Антон ПОКРЕПА | Россия | Москва |
132 | Леонид ШВЫРЯЕВ | Россия | Саратов |
Региональная весна в России | openDemocracy
Даже ветераны оппозиции не сомневались что Путин победит 4 марта. Однако во многих регионах России это также была дата местных выборов, и здесь и кампании, и результаты оказались менее предсказуемыми. Низкий рейтинг «Единой России» в декабре и митинги протеста в Москве стали тревожным сигналом для российских регионов, а региональные выборы возродили давно забытую концепцию конкурентной политики.
Алексея проблемыАлексею предстоит преодолеть около 500 километров в день. Он работает в московской фирме консультантов, специализирующейся на региональном выборы. В настоящее время компания работает в Вологодской области. Алексей отвечает за восточную часть региона, площадь в три раза больше Бельгия. Его миссия двоякая: обеспечить, чтобы Путин получил больше голосов на 4-м месте. Марта, чем «Единая Россия» 4 декабря, и чтобы этот округ На выборах главы совета побеждают кандидаты, согласованные с губернаторами регионов.
‘Юнайтед Плохие показатели России в декабре послужили стимулом для оппозиции в регионах. Эта оппозиция обычно не связана с парламентскими партиями, такими как Коммунисты или «Справедливая Россия», не говоря уже о «неофициальной» оппозиции. Но каждый В регионе есть своя оппозиция — отстраненная от власти местная элита. Теперь это признал возможность ».
Первую часть относительно легко организовать. В северо-восточных районах Вологды, в Тотьме, Нюксенице и Никольск, как и везде в провинциальной России, основным инструментом предвыборной кампании Путина является телевидение.Единственная задача Алексея — сделать так, чтобы кандидаты от «Единой России» не вините федеральные власти в местных проблемах. Выборы Путина машина выдала строгие инструкции: все негативное — исключительно вниз к отказу со стороны местного самоуправления. Неважно, если местный количество голосов кандидата снизилось по сравнению с четырьмя годами назад, пока Путин получает максимум количество голосов.
Но не все так просто. На парламентские выборы 4 декабря Вологодская область вернулась низкий голос за «Единую Россию» и ее губернатора Вячеслава Позгалева пришлось уйти в отставку.Его преемник, бывший мэр Череповца Олег Кувшинников, на этот раз не должен ошибиться.
Второй гол Алексея, чтобы обеспечить Победа кандидатов в «губернаторском списке» гораздо сложнее. Объединенный Плохие показатели России в декабре послужили стимулом для оппозиции в регионах. Эта оппозиция обычно не связана с парламентскими партиями, такими как Коммунисты или «Справедливая Россия», не говоря уже о «неофициальной» оппозиции. Но каждый В регионе есть своя оппозиция — отстраненная от власти местная элита.Теперь он признал возможность.
Это раньше Алексей мог работать из своего офиса в Володге, оставаясь в связаться с его местным персоналом по телефону и только изредка иметь дело с проблемы лично. Но теперь он ежедневно преодолевает расстояние больше, чем расстояние между Париж и Берлин, по разбитым и скользким дорогам, наблюдают за своим полем. рабочих успехов и консультирование региональных партийных боссов.
Восстание в ПорховеПорхов — небольшой район в Пскове. область, с населением около 20 000 человек.Его средневековый форт — напоминание осады во время феодальных войн. До начала 2012 года ни региональный ни районные администрации не могли предположить, что выборы лидера районного совета может превратиться в неприятную битву. Если бы Вологодская область была всегда склонен к неясным политическим конфликтам, в которых участвуют владельцы бизнеса из соседние районы, Псковская область всегда была классической путинской державой. вертикальный. Его молодой губернатор Андрей Турчак — московский назначенец, полностью лояльный Кремлю, который требует такой же уровень лояльности со стороны руководителей районных советов и закрывает глаза к любым злоупотреблениям властью.
Виктор Степанов, победитель муниципальных выборов Порхов. Псковский губернатор Андрей Турчак поддержал его как кандидата, но окончательная победа Степанова далась нелегко. (фото: informpskov.ru).
Виктор Степанов, лидер Порхов райсовета, полностью отвечает всем требованиям: он следует указаниям из Пскова. к письму и при этом делает то, что ему нравится в своем районе. В местные жители скажут вам, что в этом районе нет магазина, принадлежит одному из родственников Степанова.Немногочисленные предприятия в районе также либо принадлежат членам семьи Степанова, либо платят ему деньги за охрану. Уровень жизни здесь невысокий, но Степанов построил себе роскошь. вилла на реке Шелонь. Еще он водит дорогую машину, а местные губернатор, как известно, советовал ему «смягчить его». Степанов все еще имеет автомобиль.
До декабря 2011 г. предполагалось, что весенние выборы в районный совет автоматически подтвердили бы его как лидера. Но вдруг выяснилось, что у Степанова немало соперников, которые чувствуют что он должен быть отстранен от власти.
‘
United России не существуетАлексей приезжает в городок Нюксеница и сразу направляется в офис руководителя районного совета, чтобы обсудить выборы кампания. От лидера совета не ожидается никаких инициатив. Его функция — запустить кампанию по расписанию, установленному Алексеем, а также отметить местные проблемы.
Некоторые районы Вологодской области страдают от соперничества между местными лесозаготовительными компаниями и их соперниками из соседних Архангельская область.В преддверии местных выборов Архангельск часто терпит поражение. своего кандидата и покрывает его или ее расходы на предвыборную кампанию. Это обычное дело практика в районах на границе двух регионов.
У Нюксеницы другая проблема. Местный лидер совета, который находится на посту с начала 90-х, наконец-то встал. вниз. Он выбрал себе преемника, своего заместителя, делового, но несколько застенчивый мужчина без опыта общественных дел. Этот преемник был утвержден губернатора области, и избирателям остается только ратифицировать его преемственность на избирательных участках.
«Конфиденциальный опрос, проведенный в Вологде. области в начале января выяснилось, что членство в «Партии аферистов и воровская ответственность для любого кандидата ».
Но тут возникает проблема. Официальный кандидат настолько слаб, что маленькая Нюксеница произвела соперника-претендента на работа. Этот местный кандидат от коммунистов молод, хорошо ладит с местными жителями. и не боится критиковать руководителя совета. Есть невысказанное Согласие, что он не сланец Путина.
До декабря национального парламента Выборы, предвыборная кампания любого официального кандидата предполагала его или ее членство в «Единой России», а «Единая Россия» была «партией Путина». Хотя на 4 декабря «Единая Россия» набрала наибольшее количество голосов, вы больше об этом не будут говорить в СМИ.
Виктор Локтев, победитель нюксеницких выборов. Московские консультанты по выборам боялись, что их застенчивый и скромный кандидат может проиграть откровенному соперники.
Кандидат в утвержденный «Список губернатора» может упоминать в своей биографии, что он был пионером и Комсомолец, но он не скажет, что теперь член «Единой России». А конфиденциальный опрос, проведенный в Вологодской области в начале января, выявил что членство в «партии мошенников и воров» является ответственностью за любые кандидат.
В преддверии выборов политическая партии в большинстве округов подписывают совместное заявление с просьбой к избирателям «проголосовать за стабильность », т.е. для кандидата от губернаторского списка. Единая Россия — это указаны здесь как одна из многих. Это правда, что он на первом месте, но только потому, что в русском языке его название стоит выше по алфавиту.
Дельфины в реке Шелонь
«Я обещал городу Порхову искупаться. бассейн, но мои соотечественники заслуживают лучшего. Вместо бассейна город будет есть дельфинарий. »
Яркий плакат наклеен на шелушение лакокрасочного покрытия местной автобусной остановки в селе Пава.На нем, район председатель совета Степанов описывает свои планы по строительству двенадцатиэтажной гостиницы, дельфинарий и вертолетная площадка для туристов, которые построят в центре Порхова. По впечатлению художника бледно-голубые дельфины прыгают выше башни. древней крепости. Он также обещает переселить жителей окружать дома в другие, неуказанные места, и вводить плату для выхода в лес.
«Избирательная машина Путина ввела строгие правила. инструкции: все отрицательное — это исключительно неудача со стороны местное самоуправление .’
Неясно, какой из Степановских противники предлагали купить дельфинов на его имя за государственные средства. У лидера совета есть три серьезных соперника: коммунист, его бывший заместитель и председатель сельсовета. Все трое пользуются финансовым влиянием и некоторой популярностью среди населения. Коммунист подчеркнул свою готовность встретиться с избирателями — он рад поговорить со всеми одинокий местный житель. Глава села и бывший депутат создали сеть полномасштабных кампаний.Каждую неделю член их команды собирается избирателям и раздает информационные бюллетени, листовки и календари с указанием дат Церковные праздники. Ночью плакаты с дельфинами и фото совета на стенах появляются виллы лидера.
«Конфиденциальный опрос, проведенный в Вологде. области в начале января выяснилось, что членство в «Партии аферистов и воровская ответственность для любого кандидата ».
Год назад регистрация любого кандидаты оппозиции местными избирательными комиссиями были бы заблокированы Степановым напрямую или через областные власти.Теперь это опция недоступна. Губернатор оказал ему словесную поддержку, но отказался запретить своих соперников-кандидатов.
Последним эксклюзивным курортом Степанова является подкупить избирателей. Он начал задолго до официальной избирательной кампании. В в течение трех месяцев он встречался с большинством электората, где он раздавал подарки и обещания. Это не было вариантом для его оппонентов.
Путешественники собираются у автобуса приют. Пожилые женщины обсуждают плакат.Один из них говорит: «Не более реклама! »Двое мужчин среднего возраста лучше понимают его значение. «Что такое за эту чушь? — говорит один, — лучше бы про то, как Степанов обдирал весь район ». «Все это уже знают», — отвечает другой.
Все знают, но ни у кого нет сомнений что Степанов останется руководителем совета.
я не нарушу законСоцопросы в России не проводятся. Нюксеница, но за неделю до выборов опыт Алексея подсказывает ему, что кандидат, одобренный действующим руководителем совета, не может победить.И действительно на к вечеру выборов ему не хватило 300 голосов до победы. Председатель местная избирательная комиссия отказывается набивать ящики, чтобы компенсировать разницу. Она не хочет нарушать закон, хотя на президентских выборах Голосование за Путина претерпело небольшую корректировку.
Андрей Турчак (слева), губернатор Псковской области, был главный гость на инаугурации Виктора Степанова на очередной срок на посту председателя совета (фото: www.pskov.ru)
В других районах официально утвержден кандидаты победили.В большинстве случаев разрыв между выигрышами кандидата и его ближайшего соперника было всего от 500 до 1000 голосов. Голосование больше не формальность; победителям пришлось нелегко. В следующий На выборах Алексею нужно будет очень много потрудиться, чтобы получить нужный результат.
В Порхове Виктор Степанов победил на выборах с гораздо более убедительным большинством. Но его противники сформировали против него коалицию и полны решимости добиться от него из. «Больше никаких шуток о дельфинах», — говорят они мне, «пора серьезно политика’.
Марк Робертс Ежемесячный курс
Разместите свои комментарии?
Ежемесячно + Марк Робер: Creative Engineering
1 час назад A Ежемесячный курс с Марк Робер К концу месяца создайте 3 персонализированные сборки. Сильно повысьте свои инженерные навыки с помощью пошаговой учебной программы, рассчитанной на месяц.
Веб-сайт: Monthly.com
Категория : Используйте слова в предложении
Ежемесячно, Отметка, Месяц
Марк Робертс ежемесячный урок (46 новых курсов)
3 часа назад Марк Бесплатные онлайн-курсы.com Все курсы. 7 часов назад Марк Робер Онлайн Класс (38 новых курсов) Где Newhotcourses.com Связанные курсы. Только сейчас Марк Робер: Креативная инженерия Ежемесячно Онлайн-классы. Где Ежемесячно .com Связанные курсы. 2 часа назад Марк Робер — изобретатель и бывший инженер Apple и NASA, где он проработал 7 лет над
Веб-сайт: Newhotcourses.com
Категория : Используйте класс в предложении
Mark, ежемесячно
Ежемесячные онлайн-классы посвящаются вашему творчеству на
4 часа назад Практические занятия от ваших любимых авторов.Чарли Пут сочетает поп, R&B и джаз, чтобы создать единственную в своем роде музыку, которая покоряет как поклонников, так и критиков. У Чарли 5 мультиплатиновых синглов и 4 номинации на Грэмми. В этом классе , станьте лучшим автором песен и продюсером.
Веб-сайт: Monthly.com
Категория : Используйте слова в предложении
Music, Multi
Марк Робер Ежемесячный курс: Project II YouTube
3 часа назад Начало 7 июня 2021 г. , Я начинаю проходить Марк Робер Ежемесячный Креативный инженерный курс.Build One публикуется как частное видео в связи с тем, что
Веб-сайт: Youtube.com
Категория : Используйте слова в предложении
Mark, Monthly
Mark Robers Monthly Class: Oobleck Art YouTube
3 часа назад Это наш куб размером 1x1x1ft, прикрепленный к 8-дюймовому сабвуферу с помощью Oobleck (неньютоновская жидкость). Я использовал Arduino для создания синусоидальной волны 60 Гц, усиленной на сабвуфер.
Веб-сайт: Youtube.com
Категория : Используйте слова в предложении
Ежемесячный обзор занятий Марка Робера freeonlinecourses.com
3 часа назад Марк Робер: Творческое проектирование Ежемесячно Онлайн… Строит Ежемесячно .com Подробнее . 1 час назад Инженер 3 креативных сборки за 30 дней. Бывший инженер НАСА и YouTube Марк Робер научит вас всему, что знает, в этом месячном классе . Погрузитесь в процесс и оставьте класс с 3 персонализированными инженерными сборками и….Категория: Mark rober творческие инженерные классы Показать еще
Веб-сайт: Free-onlinecourses.com
Категория : Используйте слова в предложении
Mark, Monthly, Month, More
Sell in Marketplace Mark Roberts Marketplace
3 часа назад Продайте свои Mark Roberts продуктов миллионам покупателей в Интернете. Секрет успеха розничной торговли — это уже не просто местоположение, местоположение, местоположение.Успешные розничные торговцы теперь должны быть видимыми и доступными в Интернете так же, как они видны и доступны в автономном режиме. Вот почему мы создали торговую площадку, которая предоставляет возможность нашим розничным продавцам
Веб-сайт: Markrobertsmarketplace.com
Категория : использовать в предложении
Mark, Millions, Must, Marketplace
О нас
4 часа назад Сэнсэй Рой Огден, Сан-Дан. Адвокат, занимающийся частной практикой, Рой Огден продолжал преподавать и тренировать с тех пор, как впервые присоединился к Koei-Kan в 1995 году.В настоящее время он ведет утренний фитнес класс , а также преподает во время вечерних занятий. Сэнсэй Марк Робертс , Шо-Дан. Сэнсэй Огден и Роудс с давним стажем, лектор английского языка Калифорнийского политехнического университета
Веб-сайт: Koeikanslo.com
Категория : Используйте слова в предложении
Morning, Mark
Словарь
Часто задаваемые вопросы
Какова продолжительность курса творческой инженерии Марка Робера?
5-10 часов в неделю в течение 4 недель.Погрузитесь в процесс. К концу урока инженер 3 строит собственные конструкции. Новичок или продвинутый, этот класс повысит ваш уровень. Бывший инженер НАСА и ютубер Марк Робер научит вас всему, что знает, на этом месячном занятии.
Какие идеи приходит в голову Марк Робер?
Марк известен своими уникальными конструктивными идеями, такими как его клюшка для гольфа с ракетным двигателем и мишень для дротиков с автоматическим управлением. На этом занятии Марк раскрывает свой процесс мозгового штурма творческих идей, которые увлекают аудиторию, и показывает вам, как сделать то же самое.
Чем занимается Марк Робер в области электротехники?
Марк объясняет физику, лежащую в основе электротехнических систем, и разбирает анатомию цепи, от датчиков, используемых для обработки входных данных, до исполнительных механизмов, которые заставляют вещи происходить. Научитесь разрабатывать схемы, которые решают сложные электрические задачи.
Структура вируса леса Барма, выявленная с помощью криоэлектронной микроскопии с разрешением 6 ангстрем, имеет детальную трансмембранную архитектуру белка и взаимодействия
J Virol.2011 сен; 85 (18): 9327–9333.
, 1, 2 , 3 , 3 , 4 , 1, 2 , 4 , 3, * и 1, 9011 905 2 *Виктор А. Костюченко
1 Программа по новым инфекционным заболеваниям, Высшая медицинская школа Duke-NUS, 8 College Rd., 169857, Сингапур
2 Центр наук о биоимиджинге, Национальный университет Сингапура, Сингапур
Джоанита Якана
3 Национальный центр макромолекулярной визуализации, Верна и Маррс Маклин Департамент биохимии и молекулярной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас 77030
Сианган Лю
3 Национальный центр визуализации макромолекул Верна и Маррс Маклин, Департамент биохимии и молекулярной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас 77030
Эндрю Д.Haddow
4 WM Keck Center for Virus Imaging and Institute for Human Infections and Immunity, University of Texas Medical Branch, 301 University Blvd., Galveston, Texas
Myint Aung
1 Program in Emerging Infectious Diseases, Duke -NUS Graduate Medical School, 8 College Rd., 169857, Сингапур
2 Центр наук о биовизуализации, Национальный университет Сингапура, Сингапур
Скотт К. Уивер
4 W.Центр визуализации вирусов им. М. Кека и Институт инфекций и иммунитета человека, Медицинский филиал Техасского университета, 301 University Blvd., Galveston, Texas
Wah Chiu
3 Национальный центр макромолекулярной визуализации, Verna and Marrs Mclean Department of Биохимия и молекулярная биология, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас 77030
Ши-Мей Лок
1 Программа по новым инфекционным заболеваниям, Высшая медицинская школа Duke-NUS, 8 College Rd., 169857, Сингапур
2 Центр наук о биовизуализации, Национальный университет Сингапура, Сингапур
1 Программа по новым инфекционным заболеваниям, Высшая медицинская школа Duke-NUS, 8 College Rd., 169857, Сингапур
2 Центр наук о биовизуализации, Национальный университет Сингапура, Сингапур
3 Национальный центр макромолекулярной визуализации, Верна и Маррс Маклин, Департамент биохимии и молекулярной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас 77030
4 W.Центр визуализации вирусов им. М. Кека и Институт человеческих инфекций и иммунитета, Медицинский филиал Техасского университета, 301 University Blvd., Galveston, Texas
* Автор, отвечающий за переписку. Почтовый адрес С.-М. Лок: Программа по новым инфекционным заболеваниям, Высшая медицинская школа Duke-NUS, 8 College Rd., 169857, Сингапур. Телефон: 6565165840. Факс: 6562212529. Электронная почта: [email protected]. Почтовый адрес У. Чиу: Национальный центр макромолекулярной визуализации, Верна и Маррс Маклин, Департамент биохимии и молекулярной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас 77030.Телефон: (713) 798-6985. Факс: (713) 798-8682. Электронная почта: ude.mcb@haw.Поступило 3 мая 2011 г .; Принято 29 июня 2011 г.
Copyright © 2011, Американское общество микробиологии. Все права защищены. Эту статью цитировали в других статьях в PMC.- Дополнительные материалы
[Дополнительный материал]
GUID: A7FF0D54-5463-41EF-BE24-ED8649F99DBF
GUID: A41C1268-F4DF-4EE8-BD5B-E499EA3A6482
Abstract
Вирус леса Бармах (BFV) — это переносимый комарами альфавирус, поражающий людей.Трехмерная структура BFV с разрешением 6 Å, полученная с помощью криоэлектронной микроскопии, демонстрирует типичную альфавирусную организацию с РНК-содержащим нуклеокапсидом, окруженным билипидной мембраной, заякоренной поверхностными белками E1 и E2. Карта позволяет увидеть детали трансмембранных областей E1 и E2. С-конец трансмембранной спирали E2 связывается с капсидным белком. После трансмембранной спирали E2 короткий α-спиральный эндодомен лежит на внутренней поверхности липидной оболочки.Эндодомен E2 взаимодействует с трансмембранной спиралью E1 из соседнего тримерного шипа E1-E2, тем самым действуя как спейсер и линкер между шипами. В соответствии с предыдущими исследованиями мутагенеза, эндодомен играет важную роль в рекрутировании др. Шипов E1-E2 в сайт почкования во время сборки вируса. Таким образом, эндодомен E2 может служить мишенью для разработки противовирусных препаратов.
ВВЕДЕНИЕ
Вирус леса Барма (BFV), альфавирус, переносимый комарами, был впервые выделен из пула из комаров Culex annulirostris , собранных на юго-востоке Австралии в 1974 г. (23).Во время первоначальной классификации BFV было замечено, что иммунные сыворотки против вируса не показали перекрестной нейтрализации или ингибирования перекрестной гемагглютинации (HI) по отношению к другим альфавирусам, но показали низкие уровни перекрестной реактивности HI с вирусом буньявируса, вирусом Umbre. . Это привело к ошибочной классификации вируса как вируса-буньявируса (23). Однако дальнейший анализ его жизненного цикла (5) и полной последовательности генома BFV (18) показал, что это альфавирус из клады вируса леса Семлики (SFV).
Инфекция BFV вызывает у людей легкое заболевание с симптомами, аналогичными тем, которые наблюдаются при инфекциях, вызванных вирусом Росс-Ривер (RRV): лихорадка, сыпь, болезненность мышц и полиартрит (12). Лихорадка обычно проходит самостоятельно и обычно проходит в течение недели, но боль в суставах и мышцах может сохраняться до 6 месяцев или дольше, что делает инфекцию BFV серьезной проблемой для общественного здравоохранения (12). С момента его открытия количество зарегистрированных случаев увеличилось по всей Австралии (12), отчасти благодаря доступности более совершенных диагностических инструментов и усилению эпиднадзора.В настоящее время BFV является причиной вспышек заболеваний человека в Австралии. Хотя животный резервуар остается неизвестным, недавние серологические данные свидетельствуют о том, что лошади или опоссумы служат в качестве хозяев для амплификации (12). Увеличение числа поездок и торговли, несомненно, повысит риск того, что BFV будет занесен на другие континенты.
Альфавирусы ( Togaviridae : Alphavirus ) представляют собой одноцепочечные вирусы с положительной смысловой РНК, геном которых кодирует пять структурных белков: капсид (или ядро), E3, E2, 6K и E1 (15).Существует несколько трехмерных (3D) реконструкций альфавирусов с помощью криоэлектронной микроскопии (крио-ЭМ) с двумя структурами, решенными с разрешением 9 Å, для SFV (22) и вируса Синдбис (SINV) (24). Карты с разрешением 9 Å позволили точно разместить кристаллические структуры эктодоменов E1, E2 и C-концевой части капсидного белка, и их общее расположение оказалось аналогичным (24). Вирусная частица имеет диаметр примерно 700 Å (a и b). Внутренняя часть вириона состоит из 10.Одноцепочечная позитивно-смысловая РНК размером 5 т.п.н. (18). Геном заключен в икосаэдрическую оболочку T = 4 (1), собранную из 240 копий капсидного белка, образующего нуклеокапсид (b). Билипидная оболочка, происходящая из плазматической мембраны хозяина, зажата между нуклеокапсидом и гликопротеиновой оболочкой, образующей поверхность вируса (b). Восемьдесят шипов (a; также см. Схематическую диаграмму шипа), каждый из которых состоит из тримера гетеродимеров эктодоменов E1 и E2, также расположенных в симметрии T = 4, образуют внешнюю оболочку альфавирусной частицы (19, 24). .Эктодомен E1 участвует в слиянии вируса с эндосомной мембраной во время проникновения вируса в клетки-хозяева (8), в то время как E2 участвует в связывании рецептора и содержит большинство нейтрализующих эпитопов (11). Каждый эктодомен заякорен в липидной оболочке трансмембранной спиралью на С-конце.
Общая структура и организация BFV. (а) Крио-ЭМ карта с разрешением 6 Å низкочастотного фильтра BFV, отфильтрованного с разрешением 10 Å для ясности. Цвета соответствуют радиусу: зеленый — менее 260 Å, голубой — от 260 до 290 Å и синий — от 290 до 350 Å.Масштабная линейка составляет 100 Å. (b) Четверть центральной части крио-ЭМ карты BFV. Плотности, соответствующие участку РНК, оболочке нуклеокапсида, липидной мембране и слоям гликопротеина E1 / E2, окрашены в красный, желтый, зеленый и синий цвета соответственно.
Принципиальная схема двух соседних тримерных шипов E1 / E2. Взаимодействия между эктодоменами E1 на внешней стороне плазматической мембраны (пунктирные линии) и между эндодоменами E2 (ed) и трансмембранными спиралями E1 (зеленые TM) (зубчатые линии) формируют связи между всеми тримерными шипами E1 / E2.
Кристаллические структуры эктодомена E1 из SFV (8, 30), вируса Чикунгунья (CHIKV) (36) и SINV (19) имеют схожие структуры. Эктодомен E1 (a) состоит из трех доменов, названных DI, DII и DIII (8). Эти домены состоят в основном из β-листов, причем DIII имеет супериммуноглобулиновую складку. Кончик DII содержит петлю слияния: участок из нескольких гидрофобных остатков, который имеет решающее значение для слияния липидной мембраны во время проникновения вируса. Подгонка кристаллической структуры E1 к крио-EM-карте SINV (24, 40) показала, что эктодомены E1 лежат по касательной к липидной оболочке, образуя окраину шипов.Кристаллическая структура постфузионного эктодомена E1 (подвергающегося воздействию низких значений pH и липосом, имитирующего эндосомную среду во время слияния) показала, что он образует гомотримеры (8). В этом состоянии общая структура каждого мономера E1 почти идентична структуре до слияния, за исключением смещения DIII ближе к кончику DII. Структурная организация E1 очень похожа на структуру белка E флавивирусов (29), хотя у них мало схожих последовательностей.
Общая структура и соответствие структур E1, E2 и капсида крио-ЭМ карте BFV.(а) Расположение E1, E2 и капсида в структуре BFV. (б) Часть эктодомена E1 соответствует карте плотности крио-ЭМ. (c) Уникальный сайт гликозилирования на E1 BFV. Показана боковая цепь Asn209. Плотность, соответствующая гликану, указана черной стрелкой. (d) Подгонка белка капсида до плотности крио-ЭМ и отслеживание 10 дополнительных остатков, Asn97-Ile106 на N-конце белка, обращенного к геному РНК.
Кристаллическая структура эктодомена E2 из SINV (19) и CHIKV (36) была недавно определена.Они состоят из трех доменов, обозначенных A, B и C (a), с доменом B, присоединенным через β-ленту, которая обвивает домен A. В гетеродимере E1-E2 домен B покрывает петлю слияния E1; это взаимодействие нарушается, когда вирус подвергается воздействию среды эндосомы с низким pH во время слияния (19, 36). Трансмембранная область и С-концевой эндодомен E2 были изучены с помощью мутагенеза (9, 38, 39). Было показано, что C-концевой конец трансмембранной спирали участвует в прикреплении нуклеокапсида во время почкования вируса, а эндодомен является критическим для сборки вируса.
Обычно E3 присутствует только в незрелом вирусе, где он связывается с доменом B E2 и, возможно, с областью вокруг петли слияния E1 (36). Предположительно, его функция состоит в том, чтобы удерживать домен B E2 на месте, чтобы удерживать петлю слияния E1 закрытой даже в среде с низким pH секреторной сети транс-Гольджи, предотвращая слияние вновь синтезированного E1 обратно в клетку. Во время созревания E3 отщепляется протеазой фурина, и молекулы E3 диссоциируют с поверхности вируса, когда он покидает клетку-хозяина, производя инфекционный, способный к слиянию вирус.
КриоЭМ карты с разрешением 9 Å SINV (24) и SFV (22) позволяют точно позиционировать эктодомены E1 и E2 во внешней оболочке (19, 24, 36). Также было возможно смоделировать и подогнать части трансмембранных областей E1 и E2 на крио-ЭМ карты. Хотя известно, что эндодомен на конце трансмембранной спирали E2 важен для сборки вируса (39), он не наблюдался ни на одной из крио-ЭМ-карт.
Здесь мы представляем крио-ЭМ карту BFV, определенную с разрешением 6 Å, что является существенным улучшением по сравнению с ранее опубликованными результатами.Конец трансмембранной спирали E2 взаимодействует с капсидным белком. Следуя за трансмембранной спиралью E2, плотность спирали эндодомена E2, как наблюдают, лежит во внутреннем слое липидной оболочки, и она, по-видимому, взаимодействует с трансмембранной спиралью E1 от соседнего шипа. Эти наблюдения вместе с предыдущими исследованиями мутагенеза демонстрируют важность трансмембранной спирали E2 и эндодомена в сборке альфавирусов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Получение и очистка вирусов.
Все манипуляции с вирусами проводились в лабораториях с уровнем биобезопасности 2 с использованием рекомендованных процедур (35). Штамм BFV Bh3193 был выделен из комаров Culex annulirostris в лесу Бармах, Виктория, Австралия, в феврале 1974 года. Вирус один раз пассировали в клетках почек африканской зеленой обезьяны (Vero), а затем использовали для заражения почек детенышей хомячка (BHK-21). клеток при множественности заражения 1 БОЕ / кл. После появления цитопатических эффектов среду для культивирования клеток, содержащую 2% эмбриональной бычьей сыворотки, собирали и осветляли центрифугированием при 2000 × g в течение 10 мин.Затем добавляли полиэтиленгликоль и NaCl до концентраций 7 и 2,3% (вес / объем) соответственно, и вирус осаждали в течение ночи при 4 ° C. После центрифугирования при 4000 × g в течение 30 минут при 4 ° C осажденный осадок ресуспендировали в буфере TEN (0,05 M трис-HCl, pH 7,4; 0,1 M NaCl; 0,001 M EDTA) и осторожно накладывали на 20-70 % (вес / объем) непрерывный градиент сахарозы в TEN. После центрифугирования при 270 000 × g в течение 1 ч полосу вируса визуализировали с использованием белого света и собирали с помощью пипетки Пастера.Собранный вирус затем центрифугировали четыре раза через фильтр Amicon Ultra-4 100-kDa (Millipore, Billerica, Massachusetts) при 4000 × г в течение 30 мин с последующим ресуспендированием в 4 мл TEN-буфера на каждом этапе для удаления остаточного количества вируса. сахароза. Конечный концентрированный вирус в 0,2 мл буфера TEN использовали для крио-ЭМ исследований.
Сбор и обработка изображений Cryo-EM.
Три микролитра концентрированного образца вируса наслоили на решетки Quantifoil, покрытые тонким углеродом, затем раствор промокали фильтровальной бумагой в течение 1 с и решетку мгновенно замораживали в жидком этане при 170 К с использованием поршня FEI Vitrobot Mark IV.Изображения были получены на электронном микроскопе JEOL JEM3200FSC на 300 кВ, оборудованном энергетическим фильтром, при эффективном увеличении 105 571 и дозе электронов 23 э / Å 2 . Изображения были записаны на камеру устройства с зарядовой связью (ПЗС) с разрешением 4000 на 4000 пикселей (в результате размер пикселя 1,42 Å) с диапазоном значений недостаточной фокусировки от 0,5 до 3 мкм. Всего было собрано 760 изображений; изображения, которые демонстрировали размытость из-за смещения и астигматизма, были отброшены. Параметры функции передачи контраста (CTF) остальных изображений оценивали с помощью программы ctfit из пакета программ EMAN (21).Для дальнейшей обработки были выбраны изображения с кольцами Thon с разрешением выше 8 Å.
Крио-ЭМ реконструкция изображений.
Индивидуальные изображения вирусных частиц были собраны с использованием программы автоматического сбора частиц ETHAN (16) с последующим визуальным осмотром и удалением сломанных или деформированных вирусных частиц. Для реконструкции изображения было выбрано 9 585 частиц. Изображения были нормализованы перед поиском ориентации и 3D-реконструкцией. Поиск ориентации проводился с помощью программы моделирования многолучевого отжига (MPSA) (20).Этот метод одновременно выполняет поиск как ориентации, так и положения каждого изображения в пространстве Фурье, сводя к минимуму несоответствие общих линий между необработанным изображением частицы и набором эталонных проекций. В качестве исходной опорной модели использовалась трехмерная карта VEEV (W. Chiu, неопубликованные данные). Для последующих циклов в качестве эталонной модели использовалась карта из предыдущего цикла. При поиске ориентации с помощью программы MPSA использовались параметры по умолчанию, за исключением количества опорных проекций и диапазона разрешения данных в пространстве Фурье.Для первых двух итераций мы использовали семь проекций в качестве эталонов, а диапазон разрешения данных был установлен от 12 до 100 Å; Как только модель достигла субнанометрового разрешения, мы использовали 12 проекций для дальнейшего уточнения, а диапазон данных был установлен от 5 до 100 Å. Чтобы проверить найденную ориентацию для каждого изображения частицы, MPSA провела проверку согласованности ориентации, выполнив до семи независимых прогонов поиска ориентации и приняв ориентацию только в том случае, если четыре результата сходились к одной и той же ориентации (в пределах ошибки 2 пикселя в центре). положение и 1.5 градусов по углам ориентации). Только частицы, соответствующие этим критериям, использовались для 3D-реконструкции в каждом цикле. В среднем за каждый цикл выбиралось от 4000 до 5200 из 9565 изображений. Трехмерная реконструкция проводилась с помощью программы make3d от EMAN. И MPSA, и make3d были адаптированы для работы на вычислительном оборудовании NVIDIA Tesla для ускорения времени обработки (с ~ 100-кратным увеличением скорости для MPSA и ~ 10-кратным увеличением для make3d). В процессе реконструкции CTF корректировалась с использованием модификации схемы фильтрации Винера (13).Разрешение карты, полученной в результате каждого цикла, было рассчитано с помощью программы RMeasure (32) для скорости и удобства. Окончательное разрешение карты составляет 6 Å при измерении с использованием корреляции Фурье-оболочки независимых наборов половинных данных с порогом 0,5 (см. Рис. S1 в дополнительном материале). Это также согласуется с наблюдением плотности некоторых боковых цепей аминокислот на карте.
Модель здания.
Модели на основе гомологии были получены с использованием программы MODELLER (6) в Chimera (26).Код банка данных по белкам (PDB) для структуры шаблона, используемой при моделировании гомологии E1, — это 2ALA, 2XFB для E2 и 1SVP для корового белка. Первоначальная подгонка к плотности была сделана вручную с помощью Chimera и уточнена с помощью процедуры «подгонки по карте» Chimera. Гибкая подгонка была выполнена с использованием протокола гибкой подгонки молекулярной динамики (MDFF) (34) в программном обеспечении моделирования молекулярной динамики VMD (10) и NAMD (27). Гибкая подгонка была сделана для смоделированных белков E1, E2 и C одновременно, чтобы гарантировать соответствие подгонки карты с межмолекулярным молекулярным взаимодействием.Масштабный коэффициент 0,5 использовался для взвешивания вклада крио-ЭМ карты в общую потенциальную энергию молекулярно-динамического моделирования. Моделирование выполнялось до тех пор, пока решения не сойдутся в стабильное решение, как определено в руководстве по MDFF, примерно после 1 000 000 циклов.
Номера доступа к структуре белка.
Крио-ЭМ карта была депонирована в базе данных электронной микроскопии под регистрационным номером EMD-1886. Смоделированные белковые структуры депонированы в PDB под кодом доступа 2YEW.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Крио-ЭМ карта BFV показана на a и b. Вирус имеет диаметр примерно 700 Å. Общая структура аналогична структуре других альфавирусов.
Гомологические модели капсида BFV и белков E1 и E2 были созданы с помощью программного обеспечения для белков MODELLER (6) с использованием кристаллических структур капсидного белка SFV (3), SFV E1 (30) и CHIKV E2 (36) в качестве эталонных матриц. , соответственно. Из-за высокого уровня идентичности последовательностей (см. Рис. S2 в дополнительном материале) расхождения между структурами моделируемых и шаблонных структур невелики: среднеквадратичное отклонение между соответствующими атомами основной цепи Cα составляло 2.2 Å для основного белка, 2,1 Å для E1 и 4,2 Å для E2 (см. Рис. S3 в дополнительном материале).
Модели гомологии E1 и E2 (a) были вручную подогнаны к плотности крио-ЭМ как твердотельные структуры (см. Рис. S4 в дополнительном материале), следуя ранее установленной схеме для SFV (36). Подгонка была улучшена (см. Рис. S4) с использованием протокола гибкой подгонки молекулярной динамики (MDFF) (34). Полученные структуры хорошо вписываются в структуру плотности (b), где три белка E2 образуют центральную выступающую ножку шипа, окруженного тремя белками E1, лежащими на периферии, расположение, которое идентично расположению других альфавирусов (19, 24, 36).Наблюдается, что домен B E2 закрывает петлю слияния белка E1 (a), аналогично кристаллической структуре комплекса CHIKV E1 и E2 при нейтральном pH (36).
Характер гликозилирования молекул E1 и E2 BFV отличается от такового у других альфавирусов. На крио-EM-карте, в соответствии с анализом последовательности, белок E1 содержит один сайт гликозилирования в Asn141, аналогично SINV и SFV. Как и SFV, BFV не содержит сайта гликозилирования на остатке 245, который присутствует в SINV.Кроме того, BFV имеет уникальный сайт гликозилирования по Asn209 (c) (18). Белок E2 BFV не имеет сайтов гликозилирования, тогда как SFV и SINV имеют один и два сайта соответственно.
Нуклеокапсид состоит из 240 копий капсидного белка. Модель гомологии белка (а) была приспособлена (как описано выше для E1 и E2) в карту плотности (d). По сравнению с кристаллической структурой можно было смоделировать около 10 недостающих N-концевых остатков, идущих от капсида к предполагаемой области связывания РНК.
Есть четыре копии белков E1, E2 и капсида в асимметричной единице икосаэдрической частицы BFV (см. Рис. S5a в дополнительном материале). Суперпозиция четырех независимо подобранных молекул каждого белка показывает большое сходство. Для белка E1, в отличие от SINV (24), который показывает небольшое вращение DIII относительно DI и DII белка E1 в пентамерных вершинах по сравнению с вращением других трех молекул E1, это вращение не наблюдается в BFV ( см. рис.S5b). Суперпозиция четырех белков E2 BFV показывает некоторые вариации положения домена B, вероятно, из-за высокой гибкости его β-ленточного звена (см. Рис. S5c). Суперпозиция четырех капсидных белков показывает, что С-концевая глобулярная часть похожа (см. Рис. S5d). Однако обращенные к РНК N-концевые части в основном неупорядочены, за исключением молекулы, близкой к икосаэдрической оси симметрии 3-го порядка (d).
Внешняя оболочка гликопротеина связана с нуклеокапсидом через трансмембранные спирали E1 / E2.Поскольку отсутствуют кристаллические структуры какой-либо трансмембранной области альфавируса, трансмембранные области BFV E1 / E2 были смоделированы как α-спирали с помощью MODELLER (6) на основе результатов предсказания вторичной структуры из веб-сервиса HNN (4). Затем структуры были подогнаны к карте плотности крио-ЭМ, и аппроксимация была оптимизирована с помощью MDFF (34). Трансмембранные α-спирали E1 и E2 расположены на краях треугольного основания шипа E1 / E2, проникая через липидную мембрану толщиной 40 Å. Каждая пара спиралей гетеродимера E1-E2 образует структуру coiled-coil (a).E1 оканчивается после трансмембранного участка и не связывается с нуклеокапсидом. Расстояние между цепями Cα трансмембранной спирали E2 и участками гидрофобного кармана капсидного белка (b) составляет примерно от 4 до 6 Å, что указывает на взаимодействие. К трансмембранной спирали E2 прикреплен короткий спиральный эндодомен (остатки с 408 по 421), который лежит на внутренней поверхности липидной оболочки (а). Расстояние между центрами эндодомена до трансмембранной спирали E1 от соседнего шипа составляет около 8 Å (c), что указывает на взаимодействие.
Взаимодействие трансмембранной спирали E2 и эндодомена. (а) Вид спереди (слева) и сбоку (справа) соответствия трансмембранной области E1 (коричневый), E2 (светло-зеленый) и эндодомена E2 (оранжевый) в крио-ЭМ карту. Белок капсида окрашен в пурпурный цвет. Черными линиями обозначены границы билипидной мембраны. (б) Взаимодействие гидрофобного кармана капсидного белка с концом трансмембранной спирали E2. Гидрофобные остатки окрашены в синий цвет. (c) Взаимодействие эндодомена E2 с трансмембранной спиралью E1 из соседнего шипа (серая лента).Расстояние (8,4 Å) между взаимодействующими сайтами измеряется между центрами спиралей. Трансмембранные области E1 и E2 и эндодомен E2 обозначены E1TM, E2TM и E2ed соответственно. Плотности электронов показаны серой сеткой.
ОБСУЖДЕНИЕ
BFV является альфавирусом и наиболее близок к кладе вируса леса Семлики (28). Выравнивание последовательностей BFV с другими альфавирусами показывает аминокислотную идентичность менее 59% в E1 и менее 45% в E2. Анализы нейтрализующих мутантов вируса венесуэльского энцефалита лошадей (VEEV) (14, 25), SINV (33) и RRV (37) предполагают, что нейтрализующие эпитопы группируются в домене E2 B (эквивалентном остаткам от 169 до 250 BFV).Сравнение последовательностей SINV, RRV и VEE с BFV показывает более низкий уровень сходства (от 23 до 30%) в домене B по сравнению с таковым в остальной части молекулы E2. Кроме того, домен B других альфавирусов гликозилирован, тогда как весь BFV E2 — нет; это, вероятно, способствует низкой активности перекрестной нейтрализации антител BFV к другим альфавирусам.
КриоЭМ структура с разрешением 6 Å показывает сложные детали и позволяет идентифицировать возможные взаимодействия между белками в BFV.Было замечено, что конец трансмембранного участка E2 взаимодействовал с капсидным белком. Это указывает на то, что трансмембранная область E2 участвует в привлечении капсида к сайту почкования. Другое новое наблюдение — небольшая плотность спирали, которая, как полагают, является эндодоменом на конце трансмембранной спирали E2. Плотность эндодомена ранее не определялась на крио-ЭМ картах SINV и SFV (см. Рис. S6 в дополнительном материале). Эндодомен E2 расположен на внутренней поверхности липидной оболочки в непосредственной близости от С-конца белка E1 от соседнего шипа (8 Å между центрами спиралей), что указывает на возможное взаимодействие (c).Перед зарождением вируса предварительно собранные спайки переносятся на плазматическую мембрану, где они будут взаимодействовать друг с другом через эктодомены E1 на внешней стороне клетки и через трансмембранную спираль E1 и эндодомен E2 на стороне цитоплазмы (). Т.о., эндодомен может играть важную роль в организации шипов E1-E2 в месте зарождения вируса на плазматической мембране.
Несколько экспериментов с участием мутирующих остатков (7, 9, 39) в или около эндодомена E2 показали, что эта область является критической для сборки вируса.Делеции различных аминокислотных остатков в эндодомене приводят к накоплению предварительно сформированных нуклеокапсидов (39) внутри клетки без образования инфекционного вируса. Удаление одного неконсервативного остатка (K391 в SINV, соответствующего V389 в BFV) около конца трансмембранной спирали E2 (9) (a) устраняет продукцию вируса в клетках млекопитающих. В нашей модели E2 мутация удаляла бы один остаток внутри трансмембранной α-спирали, который участвует во взаимодействии с капсидным белком.Эта делеция привела бы к сдвигу и скручиванию С-концевого конца трансмембранной спирали, тем самым изменяя ориентацию остатков на конце спирали, а также положение эндодомена. Это д. Мешать взаимодействию эндодомена E2 с соседними шипами, нарушая сборку вируса. Интересно, что эта мутация, по-видимому, не влияла на продукцию вируса в клетках насекомых. Клетки насекомых содержат меньшее количество холестерина, чем клетки млекопитающих, что приводит к более тонкой плазматической мембране с более высокой текучестью.Это может позволить некоторый сдвиг и вращение мутантной трансмембранной спирали E2, восстанавливая ориентацию эндодомена E2, необходимую для сборки вируса.
Известно, что как E1 (31), так и E2 (17) в альфавирусах содержат цистеины в их трансмембранных областях, которые пальмитоилированы (ковалентно связанные цепи жирных кислот, обычно пальмитат или стеарат). Трансмембрана E1 имеет только один остаток цистеина в положении 436, а E2 имеет пять: три в трансмембранной спирали (положения 384, 387 и 394) (а) и два в эндодомене (положения 414 и 415) (а).Исследования мутагенеза с SINV показывают, что замены остатков, эквивалентных 414 и 415 в эндодомене BFV, приводят к неспособности вирусных частиц собираться (7). Кроме того, замещение цистеина в положении, эквивалентном 394 в BFV, привело к снижению скорости продуцирования вируса, а также к высвобождению аберрантных частиц, что еще раз продемонстрировало важность этой модификации. На нашей карте с разрешением 6 Å плотность рядом с Cys394 может соответствовать части углеродной цепи пальмитата (b).Однако др. Сайты пальмитоилирования на трансмембранных спиралях E1 и E2 обнаруживают более низкую электронную плотность (см. Рис. S7 в дополнительном материале).
Пальмитоилированные остатки цистеина в E1 и E2. (а) Схематическая диаграмма сайтов пальмитоилирования на трансмембранных спиралях E1 и E2 и эндодомене E2. Пальмитоилированные остатки обозначены зубчатыми линиями. Эктодомены E1 и E2 обозначены E1ecto и E2ecto соответственно. (b) Крио-ЭМ плотность (черная стрелка) у Cys394 в трансмембранной спирали E2, которая соответствует части ковалентно связанной пальмитиновой кислоты.
Считается, что прикрепление длинных гидрофобных цепей жирных кислот к цистеинам помогает закрепить трансмембранные спирали внутри мембраны (2). Когда трансмембранная спираль длиннее, чем толщина мембраны, пальмитоилирование помогает спирали занять и стабилизировать наклонное положение в мембране (подобно трансмембранным спиралям E1 и E2). Кроме того, пальмитоилирование будет способствовать позиционированию белкового домена на поверхности мембраны вслед за трансмембранной областью, ситуация, наблюдаемая для эндодомена E2 (a и a).
Наша криоЭМ-структура BFV с разрешением 6 Å показывает некоторые структурные детали, которые ранее не наблюдались в структурах альфавирусов с более низким разрешением. В частности, мы можем разместить эндодомен в конце трансмембранной области E2, который взаимодействует с другими шипами E1 / E2. По-видимому, это взаимодействие важно для рекрутирования собранных шипов E1 / E2 для отпочкования вируса. Таким образом, эндодомен E2 может служить важной мишенью для разработки лекарств против альфавирусов.
БЛАГОДАРНОСТИ
Работа поддержана блочным грантом Duke-NUS (R913-200-039-263) С.-M.L., Западный региональный центр передового опыта в области биозащиты и новых исследований инфекционных заболеваний, Национальные институты здравоохранения (NIH) предоставляют S.W. U54 AIO57156, а NIH — грант P41RR002250 W.C.
Сноски
† Дополнительные материалы к этой статье можно найти на http://jvi.asm.org/.
▿ Перед печатью опубликовано 13 июля 2011 года.
СПРАВОЧНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
1. Каспар Д. Л., Клуг А. 1962. Физические принципы построения обычных вирусов.Харб Холодного источника. Symp. Quant. Биол. 27: 1–24 [PubMed] [Google Scholar] 2. Charollais J., Van Der Goot F. G. 2009. Пальмитоилирование мембранных белков (обзор). Мол. Membr. Биол. 26: 55–66 [PubMed] [Google Scholar] 3. Чой Х. К., Лу Г., Ли С., Венглер Г., Россманн М. Г. 1997. Структура корового белка вируса леса Семлики. Proteins 27: 345–359 [PubMed] [Google Scholar] 4. Комбет К., Бланше К., Геурджон К., Делаж Г. 2000. NPS @: анализ сетевой белковой последовательности. Trends Biochem. Sci. 25: 147–150 [PubMed] [Google Scholar] 5.Dalgarno L. и др. 1984. Характеристика вируса леса Барма: альфавирус с некоторыми необычными свойствами. Virology 133: 416–426 [PubMed] [Google Scholar] 6. Эсвар Н., Эрамиан Д., Уэбб Б., Шен М. Ю., Сали А. 2008. Моделирование структуры белка с помощью MODELLER. Методы Мол. Биол. 426: 145–159 [PubMed] [Google Scholar] 7. Gaedigk-Nitschko K., Schlesinger M. J. 1991. Сайт-ориентированные мутации в цитоплазматическом домене гликопротеина E2 вируса Синдбис и в белке 6K приводят к сходным дефектам сборки и образования почки вируса.Virology 183: 206–214 [PubMed] [Google Scholar] 8. Гиббонс Д. Л. и др. 2004. Конформационные изменения и белок-белковые взаимодействия гибридного белка вируса леса Семлики. Nature 427: 320–325 [PubMed] [Google Scholar] 9. Hernandez R., Lee H., Nelson C., Brown D. T. 2000. Единственная делеция в проксимальной к мембране области эндодомена гликопротеина E2 вируса Синдбис блокирует сборку вируса. J. Virol. 74: 4220–4228 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Хамфри В., Далке А., Шультен К.1996. VMD: визуальная молекулярная динамика. J. Mol. График. 14: 33–38 [PubMed] [Google Scholar] 11. Хант А. Р., Фредериксон С., Маруяма Т., Рериг Дж. Т., Блэр С. Д. 2010. Первая карта человеческих эпитопов альфавирусных белков E1 и E2 обнаруживает новый эпитоп E2 со значительной вируснейтрализующей активностью. PLoS Negl. Троп. Дис. 4: e739. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12. Якупс С. П., Уилан П. И., Карри Б. Дж. 2008. Вирус реки Росс и вирусные инфекции леса Барма: обзор истории, экологии и прогнозных моделей с последствиями для тропиков северной Австралии.Vector Borne Zoonotic Dis. 8: 283–297 [PubMed] [Google Scholar] 13. Цзян Л., Лю З., Георгиева Д., Куил М. Э., Абрахамс Дж. П. 2010. Новый метод аппроксимации коррекции амплитуды CTF для трехмерной реконструкции одиночных частиц. Ультрамикроскопия 110: 350–358 [PubMed] [Google Scholar] 14. Джонсон Б. Дж., Брубакер Дж. Р., Рериг Дж. Т., Трент Д. В. 1990. Варианты вируса венесуэльского энцефалита лошадей, которые сопротивляются нейтрализации, определяют домен гликопротеина E2. Вирусология 177: 676–683 [PubMed] [Google Scholar] 15.Хосе Дж., Снайдер Дж. Э., Кун Р. Дж. 2009. Структурная и функциональная перспектива репликации и сборки альфавирусов. Future Microbiol. 4: 837–856 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 16. Кивиоя Т., Равантти Дж., Верховский А., Укконен Э., Бамфорд Д. 2000. Метод на основе локальной средней интенсивности для идентификации сферических частиц на электронных микрофотографиях. J. Struct. Биол. 131: 126–134 [PubMed] [Google Scholar] 17. Кордюкова Л. В., Серебрякова М. В., Баратова Л. А., Вейт М. 2010. Сайт-специфическое прикрепление пальмитата или стеарата к цитоплазматическим цистеинам по сравнению с трансмембранными цистеинами является общей чертой вирусных шиповых белков.Вирусология 398: 49–56 [PubMed] [Google Scholar] 18. Ли Э. и др. 1997. Нуклеотидная последовательность генома вируса Barmah Forest. Virology 227: 509–514 [PubMed] [Google Scholar] 19. Ли Л., Хосе Дж., Сян Ю., Кун Р. Дж., Россманн М. Г. 2010. Структурные изменения белков оболочки во время слияния альфавирусов. Nature 468: 705–708 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Лю X., Jiang W., Jakana J., Chiu W. 2007. Усреднение от десятков до сотен изображений икосаэдрических частиц для разрешения элементов вторичной структуры белка с использованием алгоритма оптимизации многолучевого моделирования.J. Struct. Биол. 160: 11–27 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Людтке С. Дж., Болдуин П. Р., Чиу В. 1999. EMAN: полуавтоматическое программное обеспечение для одночастичных реконструкций с высоким разрешением. J. Struct. Биол. 128: 82–97 [PubMed] [Google Scholar] 22. Манчини Э. Дж., Кларк М., Гоуэн Б. Э., Руттен Т., Фуллер С. Д. 2000. Криоэлектронная микроскопия выявляет функциональную организацию вируса в оболочке, вируса леса Семлики. Мол. Ячейка 5: 255–266 [PubMed] [Google Scholar] 23. Маршалл И. Д., Вудроуф Г.М., Хирш С. 1982. Вирусы, выделенные из комаров, и сыворотка диких животных, собранная в долине Мюррей на юго-востоке Австралии, февраль 1974 г., во время эпидемии энцефалита. Aust. J. Exp. Биол. Med. Sci. 60: 457–470 [PubMed] [Google Scholar] 24. Mukhopadhyay S., et al. 2006. Картирование структуры и функции гликопротеинов E1 и E2 в альфавирусах. Структура 14: 63–73 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25. Перебоев А.В., Разумов И.А., Святченко В.А., Локтев В.Б.1996. Гликопротеины E2 вирусов венесуэльского и восточного энцефаломиелита лошадей содержат множественные перекрестно-реактивные эпитопы. Arch. Virol. 141: 2191–2205 [PubMed] [Google Scholar] 26. Петтерсен Э. Ф. и др. 2004. UCSF Chimera — система визуализации для поисковых исследований и анализа. J. Comput. Chem. 25: 1605–1612 [PubMed] [Google Scholar] 29. Рей Ф. А., Хайнц Ф. X., Мандл К., Кунц С., Харрисон С. С. 1995. Гликопротеин оболочки вируса клещевого энцефалита с разрешением 2 A. Nature 375: 291–298 [PubMed] [Google Scholar] 30.Руссель А., Лескар Дж., Вани М. С., Венглер Г., Рей Ф. А. 2006. Структура и взаимодействия на вирусной поверхности белка оболочки E1 вируса леса Семлики. Структура 14: 75–86 [PubMed] [Google Scholar] 31. Шмидт М., Шмидт М. Ф., Ротт Р. 1988. Химическая идентификация цистеина как сайта пальмитоилирования в трансмембранном белке (вирус леса Семлики E1). J. Biol. Chem. 263: 18635–18639 [PubMed] [Google Scholar] 32. Соуза Д., Григорьев Н. 2007. Измерение разрешения Ab initio для одночастичных структур.J. Struct. Биол. 157: 201–210 [PubMed] [Google Scholar] 33. Штраус Э. Г., Стек Д. С., Шмальджон А. Л., Штраус Дж. Х. 1991. Идентификация антигенно важных доменов в гликопротеинах вируса Синдбис путем анализа вариантов ускользания антител. J. Virol. 65: 4654–4664 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 34. Трабуко Л. Г., Вилла Э., Шрейнер Э., Харрисон К. Б., Шультен К. 2009. Гибкая подгонка молекулярной динамики: практическое руководство по объединению криоэлектронной микроскопии и рентгеновской кристаллографии.Методы 49: 174–180 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Министерство здравоохранения и социальных служб США 2007. Биобезопасность в микробиологических и биомедицинских лабораториях, 5-е изд. Типография правительства США, Вашингтон, округ Колумбия [Google Scholar] 36. Восс Дж. Э. и др. 2010. Гликопротеиновая организация частиц вируса чикунгунья, выявленная методом рентгеновской кристаллографии. Nature 468: 709–712 [PubMed] [Google Scholar] 37. Врати С., Фернон С. А., Далгарно Л., Вейр Р. С. 1988. Местоположение основного антигенного сайта, участвующего в нейтрализации вируса Росс-Ривер.Вирусология 162: 346–353 [PubMed] [Google Scholar] 38. Вест Дж., Браун Д. Т. 2006. Роль консервативного трипептида в эндодомене гликопротеина E2 вируса Синдбис в сборке и функционировании вируса. J. Gen. Virol. 87: 657–664 [PubMed] [Google Scholar] 39. Вест Дж., Эрнандес Р., Феррейра Д., Браун Д. Т. 2006. Мутации в эндодомене гликопротеина E2 вируса Синдбис определяют последовательности, важные для сборки вируса. J. Virol. 80: 4458–4468 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]Краткое содержание | Контроль над опасными патогенами: план для U.Южно-российское сотрудничество: отчет по Программе совместного уменьшения угрозы Министерства обороны США
◆ ◆ ◆ ◆ ◆
Краткое содержаниеПосле обширных консультаций с ключевыми российскими официальными лицами и руководителями научных кругов и использования опыта, полученного в ходе инициирования шести пилотных проектов на двух российских объектах для исследования практических аспектов сотрудничества , Национальная академия наук Комитет по У.Южно-российское сотрудничество по опасным патогенам рекомендует пятилетнюю инициативу по патогенам, с последующим вторым этапом длительных совместных американо-российских исследований и связанных с этим усилий. Программа будет поддерживать сотрудничество в области эпидемиологии, профилактики, диагностики и лечения заболеваний, связанных с опасными патогенами, которые представляют серьезную угрозу общественному здоровью, , а также соответствующих фундаментальных исследований. Инициатива по патогенам привлечет значительное количество высококвалифицированных специалистов из бывшего советского комплекса биологического оружия и будет обслуживать важных U.С. Цели национальной безопасности и общественного здравоохранения.
КОНТЕКСТСтремительный прогресс биологических наук и биотехнологий обещает радикальное улучшение здоровья человека, сельского хозяйства и других аспектов жизни. Широкое распространение знаний и возможностей позволяет многим странам извлекать выгоду из этих достижений.
Однако распространение биотехнологии также сопряжено со значительными рисками. Возможности, связанные с исследованиями опасных патогенов человека, животных и растений, представляют собой сложную технологию двойного назначения; некоторые знания медицины, сельского хозяйства и биотехнологии частично совпадают со знаниями, необходимыми для использования патогенов во враждебных целях.Кроме того, часть оборудования и сооружений универсальна. Например, некоторые типы вакцинных предприятий можно было бы переоборудовать для производства биологических агентов для использования вооруженными силами или террористами.
Международное сообщество отреагировало на угрозу биологического оружия (БО), создав международный режим — основанный на Женевском протоколе и Конвенции о биологическом оружии (КБО) и дополненный руководящими принципами экспортного контроля Австралийской группы — для запрещения его использования и разработки. , накопление и производство, а также предотвращение их приобретения странами и субнациональными группами.Деятельность, ориентированная на конкретную страну, такую как Ирак, также является частью международных усилий по предотвращению распространения биологического оружия или реагированию на него.
BWC, однако, не содержит положений о проверке и содержит лишь ограниченные процедуры для рассмотрения предполагаемого нарушения. Достижению широкого консенсуса по укреплению международного режима в этой важнейшей области препятствует ряд факторов, не в последнюю очередь из которых глубоко укоренилось недоверие между западными странами и Россией в отношении деятельности, связанной с биологическим оружием.В 1992 году Россия признала, что Советский Союз поддерживал программу биологического оружия, включающую действия, нарушающие КБО, тем самым подтвердив давние подозрения Запада. В то время президент Ельцин заявил, что незаконная деятельность прекращена и дальнейшая работа в нарушение КБО запрещена, но российское правительство не смогло убедить Соединенные Штаты в том, что Россия в настоящее время полностью выполняет свои договорные обязательства.
Эта неопределенность усугубляется огромными размерами бывшего советского комплекса биологического оружия, который России трудно поддерживать в финансовом отношении, независимо от предполагаемого назначения объектов в настоящее время.
OMIM Entry — * 603650
Хьортшой, Т. Д., Гронсков, К., Филп, А. Р., Нишимура, Д. Ю., Адейемо, А., Ротими, К. Н., Шеффилд, В. К., Розенберг, Т., Брондум-Нильсен, К. Новые мутации в BBS5 подчеркивают важность этого гена у пациентов с синдромом Барде-Бидля неевропейского происхождения. (Письмо) Являюсь.J. Med. Genet. 146A: 517-520, 2008. [PubMed: 18203199] [Полный текст: https://doi.org/10.1002/ajmg.a.32136]
Джин, Х., Уайт, С. Р., Шида, Т., Шульц, С., Агиар, М., Гайги, С. П., Базан, Дж. Ф., Начури, М. В. Консервативные белки синдрома Барде-Бидла собирают оболочку, которая транспортирует мембранные белки к ресничкам. Cell 141: 1208-1219, 2010. [PubMed: 20603001] [Полный текст: https: // linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0092-8674(10)00551-9]
Ли, Дж. Б., Гердес, Дж. М., Хейкрафт, К. Дж., Фан, Ю., Теслович, Т. М., May-Simera, H., Li, H., Blacque, O.E., Li, L., Leitch, C.C., Lewis, R.A., Green, J.S. и 9 других. Сравнительная геномика идентифицирует протеом жгутика и базального тела, который включает ген болезни человека BBS5. Cell 117: 541-552, 2004. [PubMed: 15137946] [Полный текст: https: // linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0092867404004507]
Локтев, А.В., Чжан, К., Бек, Дж. С., Сирби, К. К., Шитц, Т. Е., Базан, Дж.Ф., Слюсарски Д. К., Шеффилд В. К., Джексон П. К., Начури М. В. Субъединица BBSome связывает цилиогенез, стабильность микротрубочек и ацетилирование. Dev. Cell 15: 854-865, 2008. [PubMed: 19081074] [Полный текст: https: // linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1534-5807(08)00473-5]
Михан, Т. Ф., Конте, Н., Уэст, Д. Б., Якобсен, Дж. О., Мейсон, Дж., Уоррен, Дж., Chen, C.-K., Tudose, I., Relac, M., Matthews, P., Karp, N., Santos, L., и 52 других. Международным консорциумом по фенотипированию мышей открыта модель заболевания из 3328 нокаутов генов. Nature Genet. 49: 1231-1238, 2017. [PubMed: 28650483] [Полный текст: https: // doi.org / 10.1038 / ng.3901]
Начуры, М. В., Локтев, А. В., Чжан, К., Вестлейк, К. Дж., Перанен, Дж., Мердес, А., Слусарски, Д.К., Шеллер, Р. Х., Базан, Дж. Ф., Шеффилд, В. К., Джексон, П. К. Базовый комплекс белков BBS взаимодействует с GTPase Rab8, способствуя биогенезу цилиарной мембраны. Cell 129: 1201-1213, 2007. [PubMed: 17574030] [Полный текст: https: // linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0092-8674(07)00534-X]
Со, С., Чжан, К., Багге, К., Бреслоу, Д. К., Сирби, К. К., Начури, М.В., Шеффилд В. Новый белок LZTFL1 регулирует цилиарный транспорт BBSome и Smoothened. PLoS Genet. 7: e1002358, 2011. Примечание: Электронная статья. [PubMed: 22072986] [Полный текст: https: // dx.plos.org/10.1371/journal.pgen.1002358]
% PDF-1.3 % 467 0 объект > эндобдж xref 467 134 0000000016 00000 н. 0000003032 00000 н. 0000004443 00000 н. 0000004601 00000 н. 0000004684 00000 н. 0000004774 00000 н. 0000004933 00000 н. 0000004993 00000 п. 0000005163 00000 п. 0000005270 00000 н. 0000005400 00000 н. 0000005460 00000 н. 0000005520 00000 н. 0000005700 00000 н. 0000005760 00000 н. 0000005869 00000 н. 0000006002 00000 н. 0000006062 00000 н. 0000006180 00000 п. 0000006240 00000 н. 0000006300 00000 н. 0000006499 00000 н. 0000006559 00000 н. 0000006671 00000 н. 0000006774 00000 н. 0000006834 00000 н. 0000006962 00000 н. 0000007022 00000 н. 0000007147 00000 н. 0000007207 00000 н. 0000007371 00000 н. 0000007431 00000 н. 0000007546 00000 н. 0000007606 00000 н. 0000007745 00000 н. 0000007805 00000 н. 0000007926 00000 н. 0000007986 00000 п. 0000008112 00000 н. 0000008172 00000 п. 0000008326 00000 н. 0000008386 00000 н. 0000008534 00000 н. 0000008594 00000 н. 0000008717 00000 н. 0000008777 00000 н. 0000008837 00000 н. 0000009031 00000 н. 0000009091 00000 н. 0000009219 00000 п. 0000009350 00000 н. 0000009410 00000 п. 0000009541 00000 н. 0000009601 00000 п. 0000009733 00000 н. 0000009793 00000 н. 0000009985 00000 н. 0000010045 00000 п. 0000010189 00000 п. 0000010249 00000 п. 0000010399 00000 п. 0000010459 00000 п. 0000010658 00000 п. 0000010718 00000 п. 0000010835 00000 п. 0000010895 00000 п. 0000011031 00000 п. 0000011091 00000 п. 0000011263 00000 п. 0000011323 00000 п. 0000011383 00000 п. 0000011587 00000 п. 0000011647 00000 п. 0000011743 00000 п. 0000011803 00000 п. 0000011979 00000 п. 0000012038 00000 п. 0000012166 00000 п. 0000012273 00000 п. 0000012333 00000 п. 0000012484 00000 п. 0000012544 00000 п. 0000012677 00000 п. 0000012737 00000 п. 0000012891 00000 п. 0000012951 00000 п. 0000013077 00000 п. 0000013137 00000 п. 0000013267 00000 п. 0000013327 00000 п. 0000013454 00000 п. 0000013514 00000 п. 0000013633 00000 п. 0000013692 00000 п. 0000013810 00000 п. 0000013869 00000 п. 0000013987 00000 п. 0000014046 00000 п. 0000014193 00000 п. 0000014252 00000 п. 0000014376 00000 п. 0000014435 00000 п. 0000014558 00000 п. 0000014617 00000 п. 0000014761 00000 п. 0000014820 00000 п. 0000014959 00000 п. 0000015018 00000 п. 0000015176 00000 п. 0000015235 00000 п. 0000015390 00000 н. 0000015449 00000 п. 0000015596 00000 п. 0000015655 00000 п. 0000015714 00000 п. 0000015883 00000 п. 0000015944 00000 п. 0000016042 00000 п. 0000016103 00000 п. 0000016164 00000 п. 0000016288 00000 п. 0000016392 00000 п. 0000016453 00000 п. 0000016514 00000 п. Y> yT {xxo.p0IWDAEow
Старые друзья? Новые враги? Ваш выбор
16 мая
ИЗМЕНЕНИЕ Режиссер Джей Стерн разработал свою инди-адаптацию якобинской пьесы о мести Томаса Миддлтона и Уильяма Роули как «историческую криминальную литературу».
18 мая
ПРАВИЛА БРУКЛИНА Трое друзей с разными приоритетами (учиться в юридической школе, присоединяться к мафии, слоняться без дела) выросли в Бруклине в 80-х годах. Майкл Корренте руководит по сценарию Теренса Винтера; с Фредди Принцем-младшим., Скотт Каан и Джерри Феррара.
CAPTIVITY Уже известная своими ужасными рекламными щитами в Лос-Анджелесе, это похожая на «пилу» история о мужчине и женщине, которые просыпаются и обнаруживают, что их держат в плену в темном сыром подвале, не имея ни малейшего представления. что они там делают. Однако у публики есть подозрения. Маловероятный режиссер — Роланд Жоффе, который, похоже, снизил взор после «Поля смерти».
ДАЖЕ ДЕНЬГИ Ветеран-режиссер Марк Райделл («Роза», «На Золотом пруду») снова садится в седло и рассказывает историю о зависимости от азартных игр и о том, как она разрушает жизни трех человек.В популярный состав входят Ким Бейсингер, Форест Уитакер, Дэнни Де Вито и Келси Грэммер.
ФЭЙ ГРИМ Хэл Хартли, кинематографический поэт-лауреат Лонг-Айленда («Доверие», «Простые люди»), ныне живущий в Берлине, предлагает продолжение своего причудливо-параноидального «Генри-дурака» 1997 года. Паркер Поузи возвращается в роли подруга и любовница Генри, таинственного литературного гения, осталась одна со своим сыном, когда он исчез. Она узнает, что парижская полиция обнаружила фрагменты рукописи утерянного шедевра Генри, и улетает, чтобы провести расследование в качестве C.Я. оперативник (Джефф Голдблюм) остается у нее на хвосте. С Джеймсом Урбаниаком и Шафран Берроуз.
ФЛАНДЕРЫ Фильм Бруно Дюмона, действие которого происходит на залитых кровью полях Первой мировой войны, представляет собой современную историю о крестьянине (которого играет непрофессиональный актер Сэмюэл Бойдин), который возвращается с далекой бесчеловечной войны.